国产精品视频成人自拍,日本韩国三级理伦久久久,人妻少妇精品一区二区

NEWS新聞資訊

公司動(dòng)態(tài) 促銷活動(dòng)

boutique精品展示

SeraCare?KPL高性價(jià)比WB底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱KPL)是國(guó)際知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,具備逾40年的產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),并已通過(guò)ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證。其產(chǎn)品批間一致性高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠,在診斷試劑行業(yè)中獲得廣泛認(rèn)可與信賴。KPL旗下產(chǎn)品線包含高性價(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開(kāi)發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。KPL品牌高性價(jià)比的底物與通用型試劑可廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(Western Blot, WB)、免疫組化(IHC)以及酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot)等多種實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。本文將重點(diǎn)介紹KPL品牌中適用于Western blotting技術(shù)的高性價(jià)比底物系列產(chǎn)品。Western blotting技術(shù)Western Blot技術(shù)是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的免疫印跡技術(shù),是免疫檢測(cè)領(lǐng)域中最流行的方法之一。它基于蛋白質(zhì)的分子量分離和特異性抗體識(shí)別,通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)后,將其轉(zhuǎn)移到固相膜上,再利用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。在Western Blot實(shí)驗(yàn)中,信號(hào)檢測(cè)是關(guān)鍵步驟,用于可視化和定量目標(biāo)蛋白。過(guò)去,比色檢測(cè)和低靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)推動(dòng)了研究的擴(kuò)展。然而,隨著對(duì)檢測(cè)靈敏度要求的不斷提高以及成像分析系統(tǒng)的進(jìn)步,化學(xué)發(fā)光分子設(shè)計(jì)也取得了顯著發(fā)展,實(shí)現(xiàn)了更高靈敏度的檢測(cè)能力。在Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中,高質(zhì)量底物對(duì)實(shí)現(xiàn)高靈敏度與低背景值至關(guān)重要。KPL提供的生色底物與化學(xué)發(fā)光底物,以其卓越的性能和可靠的質(zhì)量,成為Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中的核心組成部分,助力科研人員獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?;瘜W(xué)發(fā)光底物系列產(chǎn)品化學(xué)發(fā)光法是檢測(cè)微量蛋白質(zhì)的最佳選擇,其原理是化學(xué)發(fā)光底物在被抗體標(biāo)記的酶(如HRP或AP)催化時(shí)發(fā)光。KPL的LumiGLO®系列是基于魯米諾的HRP底物,提供從常規(guī)到超高靈敏度的完整檢測(cè)方案;KPL的PhosphaGLO?系列則是基于二氧雜環(huán)丁烷的AP底物,兼具高靈敏與操作靈活性。兩者均適用于Western Blot及ELISA應(yīng)用。LumiGLO Reserve? &LumiGLO® 化學(xué)發(fā)光底物 LumiGLO Reserve?和 LumiGLO®均是基于魯米諾的化學(xué)發(fā)光底物,專為高靈敏度檢測(cè)設(shè)計(jì)。LumiGLO Reserve?靈敏度較LumiGLO®及其他同類產(chǎn)品提升超過(guò)20倍,尤其適用于低豐度蛋白或珍貴樣本的檢測(cè);其發(fā)光信號(hào)可持續(xù)4至8小時(shí),最強(qiáng)信號(hào)出現(xiàn)在反應(yīng)后第一小時(shí)內(nèi),發(fā)光強(qiáng)度顯著,更易被化學(xué)發(fā)光成像儀清晰捕捉。該產(chǎn)品為穩(wěn)定的雙組分溶液,按1:2比例配制即用,并提供三種規(guī)格及配套濃縮型KPL洗滌液,進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)便利性。而 LumiGLO®同樣以雙組分形式提供,使用時(shí)等體積混合即可,操作簡(jiǎn)便,在Western Blot及ELISA檢測(cè)中比顯色底物更靈敏,背景低,與HRP反應(yīng)后5分鐘內(nèi)達(dá)到最大發(fā)光強(qiáng)度,信號(hào)可持續(xù)1至2小時(shí),并支持免疫印跡膜的多次剝離與重新探測(cè),線性動(dòng)態(tài)范圍優(yōu)于多數(shù)同類產(chǎn)品,廣泛適用于多種蛋白檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。兩款產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果均可通過(guò)X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行永久記錄。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度LumiGLO Reserve? ChemiluminescentSubstrate5430-0050 5430-0051 5430-0049 600 cm21000 cm22400 cm2HRP化學(xué)發(fā)光10-15-10-12LumiGLO®Chemiluminescent Substrate5430-00425430-00405430-004160 mL240 mL720 mLHRP化學(xué)發(fā)光10-12PhosphaGLO Reserve?AP&PhosphaGLO? 化學(xué)發(fā)光底物PhosphaGLO Reserve?與 PhosphaGLO?均為基于二氧雜環(huán)丁烷的即用型單組分化學(xué)發(fā)光底物,專為堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記系統(tǒng)優(yōu)化設(shè)計(jì)。PhosphaGLO Reserve?具備飛克級(jí)超高靈敏度,可精準(zhǔn)檢測(cè)低豐度蛋白,顯著減少珍貴樣本用量,并提供卓越的信號(hào)強(qiáng)度和長(zhǎng)達(dá)五天的穩(wěn)定發(fā)光,支持多次曝光或重復(fù)讀數(shù),其信號(hào)強(qiáng)度顯著優(yōu)于傳統(tǒng)顯色底物及其他化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品;而PhosphaGLO?可穩(wěn)定檢測(cè)皮克級(jí)別蛋白,無(wú)需額外封閉步驟,操作簡(jiǎn)便,發(fā)光信號(hào)可持續(xù)長(zhǎng)達(dá)五天,并在4°C條件下穩(wěn)定保存兩年。兩款產(chǎn)品均兼容 X 光膠片和化學(xué)發(fā)光成像儀等多種檢測(cè)設(shè)備,為高靈敏度蛋白質(zhì)檢測(cè)提供靈活、可靠的解決方案。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度PhosphaGLO Reserve? AP Substrate5430-00525430-005330 mL100 mLAP化學(xué)發(fā)光10-15PhosphaGLO? AP Substrate5430-00545430-005530 mL100 mLAP化學(xué)發(fā)光10-12顯色底物系列產(chǎn)品顯色底物利用酶促反應(yīng)產(chǎn)生可見(jiàn)的最終產(chǎn)物,適用于目標(biāo)蛋白含量較高的檢測(cè)場(chǎng)景。這類底物的優(yōu)勢(shì)在于其結(jié)果可以直接在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上觀察,并通過(guò)拍照長(zhǎng)期保存,無(wú)需暗室或?qū)I(yè)成像系統(tǒng)。KPL提供的顯色底物針對(duì)HRP(辣根過(guò)氧化物酶)和AP(堿性磷酸酶)檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化,具備多種靈敏度級(jí)別,確保高穩(wěn)定性和批間一致性。TMB 1 Membrane Peroxidase Substrate底物系列TMB膜過(guò)氧化物酶底物是一種高靈敏度的顯色底物,專為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)設(shè)計(jì),能夠在HRP標(biāo)記位點(diǎn)形成清晰的深藍(lán)色沉淀。這種底物提供了兩種形式:TMB 1-Component Membrane Peroxidase Substrate單組分即用型,使用方便,無(wú)需額外配制;以及TMB Membrane Peroxidase Substrate System(3-C)三組分系統(tǒng),通過(guò)省略增強(qiáng)劑,可調(diào)整為適用于ELISA的可溶性底物系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)一物多用。這兩種形式都具有出色的靈敏度和應(yīng)用靈活性,適用于Western Blot、Dot Blot以及ELISA等多種檢測(cè)方法。其高靈敏度、操作簡(jiǎn)便、多功能性和高穩(wěn)定性,使其成為膜檢測(cè)中最靈敏的顯色解決方案之一,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度TMB 1-ComponentMembrane Peroxidase Substrate5420-00295420-00275420-0028100 mL200 mL1000 mLHRP顯色10-12TMB MembranePeroxidase Substrate System(3-C)5420-0025440 mLHRP顯色10-12BCIP/NBT Phosphatase Substrate 底物系列BCIP/NBT磷酸酶底物是專為與堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的偶聯(lián)物配合使用的高效顯色檢測(cè)底物,可產(chǎn)生清晰的紫色沉淀?xiàng)l帶,同時(shí)保持極低的背景染色。該底物提供兩種形式:經(jīng)典的三組分系統(tǒng)BCIP/NBT Phosphatase Substrate System(3-C)和更便捷的單組分BCIP/NBT 1-Component Phosphatase Substrate即用型溶液。兩種形式均適用于蛋白印跡和ELISpot實(shí)驗(yàn),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,確保檢測(cè)結(jié)果的高靈敏度和可靠性。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度BCIP/NBT1-Component Phosphatase Substrate5420-0038 5420-00335420-00365420-0037100 mL6x100 mL1000 mL5000 mLAP顯色10-12-10-9BCIP/NBTPhosphatase Substrate System(3-C)5420-0030300 mLAP顯色10-12-10-9關(guān)于LGC·Seracare·KPL品牌KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。 更多>

星品推薦 | AppliChem IPEC級(jí)別甘油

甘油,一種有機(jī)化合物,化學(xué)式為C3H8O3,是一種簡(jiǎn)單的多元醇化合物。它是一種無(wú)色、透明、粘稠的液體,具有甜味和極強(qiáng)的吸濕性。甘油作為保濕劑、溶劑和潤(rùn)滑劑,廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。在醫(yī)藥行業(yè)中,高純度的甘油(如IPEC級(jí))還可用于制作藥品和疫苗。 IPEC級(jí)甘油是指按照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(Good Manufacturing Practice)生產(chǎn)的藥用級(jí)別甘油。這種甘油經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制和生產(chǎn)流程,確保其純度和安全性,以滿足藥品生產(chǎn)的高標(biāo)準(zhǔn)要求,同時(shí)具有以下特點(diǎn): 穩(wěn)定性好:甘油具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,不會(huì)輕易分解或變質(zhì),這對(duì)于藥品的長(zhǎng)期保存和使用至關(guān)重要。 安全性強(qiáng):IPEC甘油生產(chǎn)過(guò)程符合嚴(yán)格的藥品生產(chǎn)規(guī)范,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,對(duì)人體安全無(wú)害。 超高純度:雜質(zhì)極少,能夠保證在制藥過(guò)程中不會(huì)引入額外的雜質(zhì),從而保證藥品的質(zhì)量和安全性。 嚴(yán)格管控:生產(chǎn)全過(guò)程符合GMP標(biāo)準(zhǔn),確保批次間質(zhì)量一致性和可追溯性。 結(jié)合甘油自身的特性和IPEC級(jí)別產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì),IPEC級(jí)別甘油在在生物制藥中得到了廣泛的應(yīng)用。 冷凍保護(hù):在低溫冷凍過(guò)程中,甘油能滲透進(jìn)入細(xì)胞,降低細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,防止冰晶刺破細(xì)胞膜,從而保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性。 藥物穩(wěn)定:甘油能夠防止藥物成分的氧化和分解,延長(zhǎng)藥品的保質(zhì)期。 制劑配方:由于甘油良好的溶解性和穩(wěn)定性,能夠使藥物成分更好地溶解和分散,從而提高藥物的生物利用度和療效。因此甘油可以作為溶劑或保濕劑用于單克隆抗體、蛋白質(zhì)藥物的制劑配方。 培養(yǎng)添加劑:甘油可以在在無(wú)血清培養(yǎng)基中提供細(xì)胞保護(hù)作用,提高細(xì)胞存活率。 所以,IPEC甘油是生物制藥行業(yè)不可或缺的高標(biāo)準(zhǔn)原料,其嚴(yán)格的品質(zhì)要求和卓越的功能特性,確保了藥品生產(chǎn)的安全性和有效性。PanReac AppliChem作為一家品質(zhì)卓越的歐洲生物化學(xué)試劑與制藥原輔料生產(chǎn)商,擁有IPEC級(jí)別甘油。品名 貨號(hào) CAS 規(guī)格 Glycerol (Ph. Eur, BP,USP) IPEC grade 甘油 631339 56-81-5 25L AppliChem IPEC級(jí)別甘油可提供250ml規(guī)格免費(fèi)樣品,歡迎聯(lián)系西美杰申請(qǐng)測(cè)試! 西美杰是PanReac AppliChem中國(guó)總代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。 更多>

基于新型納米纖維的LentiHERO在LVV和HSV純化工藝中的應(yīng)用

溶瘤病毒如單純皰疹病毒(HSV)和痘苗病毒因能在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解和觸發(fā)免疫應(yīng)答的能力,而在癌癥治療領(lǐng)域中逐漸受到重視。同樣,慢病毒載體(LVV),如伽利略病毒(GalV)和VSV-G能夠通過(guò)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)增強(qiáng)基因治療效果。這些病毒對(duì)下游的純化策略產(chǎn)生了顛覆性影響。 常用于基因治療的病毒載體尺寸示意圖:腺相關(guān)病毒AAV、慢病毒LVV、單純皰疹病毒HSV和痘苗病毒VACV 對(duì)于這些尺寸較大的病毒載體,傳統(tǒng)的基于瓊脂糖的層析方法在工藝放大、產(chǎn)量提升以及雜質(zhì)(如HCP等)去除等方面存在局限性。為了解決這些瓶頸問(wèn)題,Astrea Bioseparations研發(fā)推出的新一代基于納米纖維的層析介質(zhì)LentiHERO為病毒純化提供了新的思路。相比于傳統(tǒng)的瓊脂糖基質(zhì),LentiHERO不論從結(jié)合載量、雜質(zhì)去除還是工藝放大等方面都具有顯著優(yōu)勢(shì)。以下研究將從病毒的結(jié)合能力、回收率、HCP和dsDNA的去除能力、工藝放大等方面充分評(píng)估LentiHERO對(duì)不同包膜(VSV-G、4070A、GalV)的LVV假病毒和溶瘤病毒HSV的純化性能。1. LVV生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO對(duì)VSV-G LVV有更高的結(jié)合力與動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 下圖是VSV-G LVV樣品在不同流速下通過(guò)LentiHERO(LH)與Q膜流穿液的TU和p24檢測(cè)結(jié)果,LentiHERO對(duì)LVV的結(jié)合能力顯著高于Q膜。由此表明,LeniHERO在LVV流穿之前能夠處理更大體積的料液。 LentiHERO有更高的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 提升LVV回收率與純度的優(yōu)化方案 如下圖所示,條件優(yōu)化后LVV回收率提升至82%,收獲的病毒滴度>2E+9 TU/mL,且HCD/HCP去除率>90%。 LentiHERO®可大幅減少純化的緩沖液體積生產(chǎn)規(guī)模所需的緩沖液體積預(yù)估 精氨酸洗脫可以省去洗脫后的稀釋步驟,簡(jiǎn)化工藝流程; 低鹽或精氨酸洗脫可顯著減少緩沖液用量并降低處理體積。 使用LentiHERO® 1純化非VSV-G包膜的LVV假病毒 重組慢病毒可以通過(guò)不同的包膜蛋白來(lái)提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和改變特異性,從而直接影響下游純化策略。 不同類型慢病毒在細(xì)胞和基因治療中的應(yīng)用 LentiHERO® 1對(duì)LVV的回收率(TU) LentiHERO®成功實(shí)現(xiàn)了非VSV-G慢病毒(4047A:100%,GalV:36%)的高效純化。 LentiHERO®具備強(qiáng)大的雜質(zhì)去除能力,在不影響載體功能的情況下可去除>98%的HCP及>87%的dsDNA殘留 2. HSV-1溶瘤病毒生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO®純化野生型HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量15ml,測(cè)得填料載量為1.5E+10 IU/ml。 感染性HSV回收率為56%,LentiHERO®載量可達(dá)9.2E+9 IU/ml,大部分感染性HSV在0.6M NaCl條件下被洗脫。 LentiHERO®純化pBACYAC-HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量20ml,測(cè)得填料載量為3E+8 IU/ml。 用0.8M精氨酸洗脫,HSV回收率可達(dá)到69%,LentiHERO®載量可達(dá)1.4E+8 IU/ml,同時(shí)實(shí)現(xiàn)高效的雜質(zhì)去除。 結(jié)論 ? LentiHERO®弱陰離子納米纖維層析技術(shù)可廣泛應(yīng)用于多種病毒載體的純化,包括不同包膜的慢病毒(4070A,VSV-G,GalV),溶瘤病毒HSV-1; ? LentiHERO®純化病毒具有高回收率:4070A: 100%,VSV-G: 82%,GalV: 36%,HSV-1: 69% ? LentiHERO®具有高效的宿主蛋白去除效率:HCP去除率>97% ? LentiHERO®可放大形成平臺(tái)工藝,適用于工業(yè)化生產(chǎn) ? LentiHERO®具備拓展應(yīng)用于其他病毒載體的潛力,如腺病毒,痘苗病毒及病毒樣顆粒(VLPs)等 ? LentiHERO®支持基因治療及溶瘤病毒生產(chǎn)工藝的優(yōu)化 產(chǎn)品信息 貨號(hào) 品名 規(guī)格 NL100100 Nereus LentiHERO 2 unit pack(離心管形式) LH0001001A LentiHERO® 1 1 mL(層析柱形式) LH0010001B LentiHERO® 10 10 mL(層析柱形式) LH0010001C LentiHERO® 100 100 mL(層析柱形式) 如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎點(diǎn)擊這里填寫信息,Astrea Bioseparations技術(shù)專家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案,切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問(wèn)題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。 更多>

新品上市!Cygnus 重組胰蛋白酶殘留檢測(cè)試劑盒

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,能特異性識(shí)別并切割細(xì)胞表面粘附蛋白中的精氨酸-賴氨酸(Arg-Lys)肽鍵。在細(xì)胞疫苗生產(chǎn)和基因治療細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,被廣泛應(yīng)用于解離HEK293、Vero等貼壁細(xì)胞,使其從培養(yǎng)容器表面高效分離。然而,成品中殘留的重組胰蛋白酶不僅可能影響工藝效率和產(chǎn)品完整性,更潛藏著安全風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)此,中國(guó)藥典(2025)制定了明確的監(jiān)管要求:在生物制品通則<生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制>中將非動(dòng)物來(lái)源蛋白水解酶列為中等風(fēng)險(xiǎn)原料;同時(shí),<人用基因治療制品總論>中規(guī)定應(yīng)對(duì)潛在的工藝相關(guān)雜質(zhì)進(jìn)行鑒定、評(píng)估,并進(jìn)行定性和(或)定量分析。為精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)并控制這一關(guān)鍵殘留雜質(zhì),Cygnus Technologies推出全新rTrypsin ELISA檢測(cè)試劑盒。該試劑盒基于雙抗夾心法原理,操作簡(jiǎn)便。在試劑盒開(kāi)發(fā)時(shí)使用重組豬胰蛋白酶制備抗體,并經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的抗原親和純化,從而確保了抗體對(duì)目標(biāo)分子的高度特異性。因此,本試劑盒成為理想的工藝開(kāi)發(fā)工具,可用于優(yōu)化重組胰蛋白酶的去除效率,并用于常規(guī)質(zhì)量控制和產(chǎn)品放行檢測(cè),助力產(chǎn)品滿足法規(guī)要求。。rTrypsin ELISA Kit 貨號(hào)F1080產(chǎn)品性能:超高靈敏度:檢測(cè)下限~0.05 ng/mL 定量下限~0.31 ng/mL優(yōu)異精密度:批內(nèi)與批間CV均 <10% Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過(guò)50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過(guò)25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來(lái)西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第18個(gè)CDE登記號(hào)-甘氨酸Glycine G-140

“熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級(jí)甘氨酸Glycine(G-140)喜獲CDE登記號(hào)F20250000403, 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第18個(gè)CDE登記號(hào)!”甘氨酸在醫(yī)藥輔料制劑中應(yīng)用廣泛,, 可作為緩沖劑,增溶劑,穩(wěn)定劑等,具有諸多優(yōu)勢(shì)。Pfanstiehl秉承一貫高品質(zhì)理念,為滿足全球生物制藥行業(yè)對(duì)于高品質(zhì)甘氨酸的需求,隆重推出的注射級(jí)甘氨酸Glycine (G-140), 具有超高純度,超低內(nèi)毒素,超低金屬殘留的特點(diǎn),單獨(dú)檢測(cè)29種金屬離子,并且新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,亞硝酸鹽等多項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的檢測(cè),符合多國(guó)藥典規(guī)定(USP, EP, BP, JPE, ChP),可用于生物治療性藥物和疫苗的生產(chǎn)。產(chǎn)品信息:· 產(chǎn)品名稱:Glycine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JPE, ChP (G-140)· 中文名稱:甘氨酸· 分子式:C2H5NO2· 分子量:75.07 g / mol· CAS號(hào):56-40-6· 產(chǎn)品貨號(hào):G-140產(chǎn)品特點(diǎn): · 超高純度,超低內(nèi)毒素,超低微生物含量,超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標(biāo)新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亞硝酸鹽檢測(cè)· 符合多國(guó)藥典:USP, EP, BP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn)· 符合GMP標(biāo)準(zhǔn)· 已獲DMF和CDE登記號(hào) 產(chǎn)品應(yīng)用:· 緩沖劑· 穩(wěn)定劑· 增溶劑如果您對(duì)Pfanstiehl注射級(jí)別Glycine G-140感興趣,歡迎聯(lián)系Pfanstiehl 中國(guó)區(qū)代理商北京西美杰科技有限公司獲得如下詳細(xì)的產(chǎn)品概況說(shuō)明文件和測(cè)試樣品。Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下,歡迎聯(lián)系北京西美杰科技有限公司獲取100g裝免費(fèi)樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國(guó)代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。 更多>

SeraCare?KPL高性價(jià)比ELISA底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱KPL)是全球知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有40余年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),獲得ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證,產(chǎn)品批間穩(wěn)定,品質(zhì)可靠,深受廣大診斷企業(yè)喜愛(ài)和好評(píng)。KPL旗下產(chǎn)品線包含高性價(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開(kāi)發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。 KPL高性價(jià)比底物及通用試劑廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)等實(shí)驗(yàn)。本文將重點(diǎn)介紹KPL高性價(jià)比ELISA底物系列產(chǎn)品。 在ELISA檢測(cè)中,3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)憑借其高靈敏度、強(qiáng)吸光性、操作簡(jiǎn)便性、安全性以及廣泛的兼容性,成為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)顯色檢測(cè)的首選底物。KPL公司開(kāi)發(fā)的SureBlue?TMB是普通TMB底物的優(yōu)化版本,擁有超過(guò)30年的應(yīng)用歷史,具備更高的靈敏度、穩(wěn)定的質(zhì)量、低批間差異以及無(wú)致癌性等特性。SureBlue Reserve?TMB是SureBlue?TMB的進(jìn)一步優(yōu)化版本,其檢測(cè)靈敏度較SureBlue?TMB提高了50%,且為水基底物,不含DMF或DMSO,采用即用型單組分配方,操作便捷,有效期長(zhǎng)達(dá)24個(gè)月。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 SureBlue Reserve? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-00815120-00825120-0083 100 mL 400 mL 1000 mL HRP 5*10-16 SureBlue? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-0075 5120-00765120-00775120-0078 100 mL 100 mL 1000 mL 5000 mL HRP 10-15 TMB 2-ComponentMicrowell Peroxidase Substrate Kit 5120-00535120-00475120-0050 200 mL 600 mL 2700 mL HRP 5*10-15 ABTS&reg;是一種通用型底物,含有2,2'-聯(lián)氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)。它提供較寬的工作范圍,適合在需要低背景和中等靈敏度的場(chǎng)景中使用。在辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的偶聯(lián)物存在下,ABTS在405至410 nm顯藍(lán)綠色,且反應(yīng)停止后顏色保持不變。它推薦用于ELISA應(yīng)用,有單組分和雙組分兩種形式可供選擇。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 ABTS&reg; 1-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00465120-00415120-0043 100 mL 6x100 mL 1000 mL HRP 10-13 ABTS&reg; 2-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00325120-0033 6x10 mL 6x450 mL HRP 10-13 BluePhos&reg;是一種專為堿性磷酸酶標(biāo)記偶聯(lián)物設(shè)計(jì)的底物,是 4-硝基苯磷酸二鈉(pNPP) 的高效替代品,作為可溶性的專利 BCIP 形式,它提供更高的靈敏度、更寬的工作范圍、更低的背景信號(hào)和更高的使用便利性。該底物采用雙組分形式,混合后即可使用,在微孔板或試管中反應(yīng)時(shí)可產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,適用于定性和定量免疫分析,與橙色或黃色底物相比,它能提供更清晰的視覺(jué)區(qū)分。產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 BluePhos&reg; Microwell Substrate(2-C) 5120-0061 5120-0059 5120-0060 50 mL 600 mL 2700 mL AP 10-13 LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve?化學(xué)發(fā)光底物是一種基于魯米諾的化學(xué)發(fā)光底物,專為與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的報(bào)告分子配合使用而設(shè)計(jì),LumiGLO Reserve?在信號(hào)強(qiáng)度方面進(jìn)行了改進(jìn),比 KPL LumiGLO&reg;和其他競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品靈敏度高出20倍以上,LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve? 化學(xué)發(fā)光底物專門用于檢測(cè)低豐度的蛋白質(zhì)或來(lái)自珍貴樣本的蛋白質(zhì)。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 LumiGLO Reserve? Chemiluminescent Substrate(3-C) 5430-00505430-00515430-0049 600 cm2 1000 cm2 2400 cm2 HRP 10-15-10-12 LumiGLO&reg; Chemiluminescent Substrate(2-C) 5430-00425430-00405430-0041 60 mL 240 mL 720 mL HRP 10-12 PhosphaGLO? AP和PhosphaGLO Reserve? AP底物均基于二氧雜環(huán)丁烷的化學(xué)發(fā)光原理設(shè)計(jì),專用于與磷酸酶(AP)標(biāo)記的報(bào)告分子配合使用。其中,PhosphaGLO Reserve? AP底物在信號(hào)強(qiáng)度上實(shí)現(xiàn)了顯著提升,特別適用于檢測(cè)低豐度蛋白質(zhì)以及珍貴樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)。PhosphaGLO?和PhosphaGLO Reserve? AP系列底物均以穩(wěn)定的單組分溶液形式提供,便于實(shí)驗(yàn)操作,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可通過(guò)X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行記錄,以獲得永久性記錄。在ELISA實(shí)驗(yàn)中,建議使用化學(xué)發(fā)光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè),以實(shí)現(xiàn)更高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 PhosphaGLO Reserve? AP Substrate(1-C) 5430-00525430-0053 30 mL 100 mL AP 10-15 PhosphaGLO? AP Substrate(1-C) 5430-00545430-0055 30 mL 100 mL AP 10-12 KPL的底物系列產(chǎn)品以其卓越的性能深受科研工作者和診斷試劑生產(chǎn)商的青睞。這些底物具有高靈敏度、批間穩(wěn)定、長(zhǎng)有效期、單組分或多組分可選、使用方便、安全環(huán)保且無(wú)致癌性等特點(diǎn),并提供多種規(guī)格以滿足不同需求。KPL還為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)實(shí)驗(yàn)提供各種輔助試劑,如包被液、封閉液、洗滌液和終止液等。歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。KPL的底物系列產(chǎn)品憑借其多樣化的選擇和卓越的性能,已成為免疫學(xué)研究和診斷試劑開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的首選品牌。 關(guān)于LGC·Seracare·KPL品牌 KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。 更多>

新品上市 | Alzet給藥泵100ul緩釋6周(Model 1006)

ALZET新推出了Model 1006給藥泵,作為滲透壓給藥泵系列產(chǎn)品線的最新成員,該新型號(hào)可實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)達(dá)6周的持續(xù)給藥,是目前在100μl規(guī)格Alzet泵中緩釋時(shí)間最長(zhǎng)的泵。Model 1006 在小劑量、長(zhǎng)周期的動(dòng)物給藥應(yīng)用中樹(shù)立了新的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。該產(chǎn)品專為臨床前研究設(shè)計(jì),能夠精確且穩(wěn)定地輸注包括藥物、激素及其他化合物在內(nèi)的多種制劑,是適用于需長(zhǎng)期維持恒定輸注速率的慢性研究項(xiàng)目的理想解決方案。 1006 Alzet泵優(yōu)勢(shì)特點(diǎn): 6周緩釋給藥——是目前100μl規(guī)格中緩釋時(shí)間最長(zhǎng)的泵尺寸精巧——適用于小鼠和其他小型動(dòng)物精確輸注——確??煽壳曳€(wěn)定的緩釋速率Alzet 1006泵參數(shù): 給藥體積:100μl 緩釋速率:0.08μl/h 持續(xù)給藥時(shí)間:6周 預(yù)啟動(dòng)時(shí)間:72h 點(diǎn)擊這里獲取1006 Alzet泵詳細(xì)使用指南。 Alzet滲透壓給藥泵產(chǎn)品列表 型號(hào) 品名 規(guī)格 1003D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋3天 10個(gè)/盒 1007D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋7天 10個(gè)/盒 1002 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 1004 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 1006 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋6周  NEW 10個(gè)/盒 2001D 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1天 10個(gè)/盒 2001 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2002 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2004 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 2006 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋6周 10個(gè)/盒 2ML1 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2ML2 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2ML4 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 北京西美杰科技有限公司是Alzet中國(guó)一級(jí)代理,可為您提供全方位的售前售后技術(shù)支持,如果您需要更多Alzet緩釋給藥泵資料,歡迎撥打西美杰全國(guó)客服熱線400-050-4006或登錄西美杰官方網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com查詢訂購(gòu)。 更多>

HCP ELISA實(shí)驗(yàn)布板優(yōu)化指南:提升數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵

截至目前,ELISA方法仍是工藝監(jiān)測(cè)和產(chǎn)品批次放行中檢測(cè)并定量HCP的金標(biāo)準(zhǔn)。Cygnus提供HCP 檢測(cè)試劑盒已經(jīng)超過(guò)25年,開(kāi)發(fā)了許多專利方法生產(chǎn)對(duì)HCP具有廣泛反應(yīng)性的抗體,目前提供超過(guò)32種不同的表達(dá)平臺(tái)的HCP ELISA檢測(cè)試劑盒。 Cygnus的ELISA試劑盒使用預(yù)包被板,檢測(cè)同時(shí)加入抗原與檢測(cè)抗體進(jìn)行孵育。HCP檢測(cè)實(shí)際上相當(dāng)復(fù)雜,主要依賴于能夠?qū)?shù)千種HCP產(chǎn)生反應(yīng)的HCP抗體,要使 ELISA檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確,針對(duì)抗原的捕獲和檢測(cè)抗體必須都要過(guò)量。只有在抗體過(guò)量的條件下,才能得到正斜率的劑量曲線,從而實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量。因此,合理的孔板布局設(shè)置是一個(gè)很好的開(kāi)始。Cygnus HCP ELISA檢測(cè)基本流程 一、HCP ELISA布板規(guī)范 1. 復(fù)孔要求 推薦采用三復(fù)孔設(shè)計(jì),三個(gè)復(fù)孔是最有效的做法,可以發(fā)現(xiàn)并去除可能出現(xiàn)的異常值,在完成實(shí)驗(yàn)后做問(wèn)題排查時(shí)能提供更多信息。需要注意的是,如果檢測(cè)樣品數(shù)量不支持設(shè)置三復(fù)孔,那么最少要設(shè)置雙復(fù)孔,沒(méi)有復(fù)孔的檢測(cè)是無(wú)效的。如果可以的話,最好對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品設(shè)置三復(fù)孔。 2. 空白對(duì)照 不建議設(shè)置額外的空白對(duì)照,扣除空白對(duì)照不會(huì)改善實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至還會(huì)導(dǎo)致CV值升高。詳情請(qǐng)參考《使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設(shè)置空白對(duì)照?》。 3. 設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照。 使用處于標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照(低濃度標(biāo)準(zhǔn)品受靈敏度影響較大)。當(dāng)使用來(lái)自HCP標(biāo)準(zhǔn)品的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),曲線中間的濃度點(diǎn)通常會(huì)提供最多的信息。 4. 設(shè)置陰性對(duì)照 使用樣品稀釋液作為空白對(duì)照,從而評(píng)估0濃度標(biāo)準(zhǔn)品與所使用的稀釋液之間是否存在顯著偏差。 5. 設(shè)置1-2個(gè)額外的HCP對(duì)照 可以使用工藝流程中的一個(gè)已經(jīng)過(guò)充分表征的在制品樣品作為額外的HCP對(duì)照。有富余孔的條件下,設(shè)置兩個(gè)稀釋度會(huì)比只有一個(gè)稀釋度效果更好。 6. 使用低結(jié)合板優(yōu)化加樣步驟 在向孔板加樣時(shí),最重要的是要思考完成每一步驟需要多長(zhǎng)時(shí)間,每一步驟的移動(dòng)方向是什么。對(duì)于這種情況,預(yù)先將待檢樣品和酶標(biāo)二抗加入低結(jié)合板內(nèi),然后再整個(gè)轉(zhuǎn)移到檢測(cè)孔板中,這樣能夠大幅減少將樣品添加到檢測(cè)板時(shí)造成的加樣誤差。 二、ELISA布板示例 樣品布板的最佳方式是將標(biāo)準(zhǔn)品置于板的左側(cè),將對(duì)照品(陰性或陽(yáng)性對(duì)照)置于板的右側(cè),同時(shí)還要考慮需要設(shè)置的復(fù)孔數(shù)量,樣品稀釋梯度,以及在加樣和洗板時(shí)的移動(dòng)方向。將標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品分別置于板的兩側(cè),確??梢詮目装宓娜我庖粋?cè)都能獲取相同的信息。這樣能夠清晰地反映出在加樣時(shí)或洗板過(guò)程中可能出現(xiàn)的任何操作失誤,而且通過(guò)改變這些孔在板內(nèi)的位置能夠更好地進(jìn)行問(wèn)題排查。 三復(fù)孔布板推薦示意圖 5個(gè)樣品4個(gè)稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對(duì)照品都設(shè)置三個(gè)復(fù)孔 雙復(fù)孔布板推薦示意圖 4個(gè)樣品和加標(biāo)控制品都設(shè)置4稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對(duì)照品都設(shè)置雙復(fù)孔 未知濃度HCP樣品布板推薦示意圖 4個(gè)樣品8個(gè)稀釋梯度,以便收集未知HCP水平樣品的大部分信息。 更多布板示例文末獲取。 三、HCP ELISA布板常見(jiàn)問(wèn)題排查及解決辦法 1. 加樣問(wèn)題 在HCP ELISA檢測(cè)過(guò)程中,每2分鐘的靜態(tài)孵育相當(dāng)于1分鐘的震蕩孵育。也就是說(shuō),如果加樣耗費(fèi)了20分鐘,就相當(dāng)于最先加入的樣品比最后加入的樣品多孵育了10分鐘。假如震蕩孵育的時(shí)間為1個(gè)小時(shí),而加樣就花費(fèi)了20分鐘,那么勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致前后加入的樣品結(jié)合效率有差異,結(jié)果表現(xiàn)為最先加入的樣品會(huì)得到偏高的OD值。因此,加樣的原則是要確保板內(nèi)所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致。如果一次需要檢測(cè)的樣品數(shù)量較多,為了避免在加樣過(guò)程耗費(fèi)太多時(shí)間,我們建議先將樣品和酶標(biāo)抗體加入低結(jié)合板中,然后再用排槍快速轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板內(nèi)。實(shí)踐證明,這種操作方法可以有效改善因加樣時(shí)間差而導(dǎo)致的結(jié)果異常問(wèn)題。 2. 洗板問(wèn)題 不合理的洗板操作也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的異常,與加樣操作類似,HCP ELISA洗板需要遵循的核心原則就是交替方向洗板,也就是盡可能確保所有孔的總清洗時(shí)間一致。關(guān)于洗板操作的注意事項(xiàng)請(qǐng)參考《如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測(cè)結(jié)果漂移的問(wèn)題?》 四 常見(jiàn)錯(cuò)誤案例與改進(jìn)辦法 案例一 加樣緩慢造成的誤差 如果同一個(gè)樣品依次從A到H行,按照1到12列方向逐孔緩慢加樣,即使采用了正確的洗板方式,這種加樣方式也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。以下熱圖示例展示了如果將相同的樣品以緩慢的速度加入孔板會(huì)發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1.000 0.976 0.952 0.928 0.904 0.880 0.856 0.832 0.808 0.784 0.760 0.736 B 0.997 0.973 0.949 0.925 0.901 0.877 0.853 0.829 0.805 0.781 0.757 0.733 C 0.994 0.970 0.946 0.922 0.898 0.874 0.850 0.826 0.802 0.778 0.754 0.730 D 0.991 0.967 0.943 0.919 0.895 0.871 0.847 0.823 0.799 0.775 0.751 0.727 E 0.988 0.964 0.940 0.916 0.892 0.868 0.844 0.820 0.796 0.772 0.748 0.724 F 0.985 0.961 0.937 0.913 0.889 0.865 0.841 0.817 0.793 0.769 0.745 0.721 G 0.982 0.958 0.934 0.910 0.886 0.862 0.838 0.814 0.790 0.766 0.742 0.718 H 0.979 0.955 0.931 0.907 0.883 0.859 0.835 0.811 0.787 0.763 0.739 0.715 改進(jìn)辦法:預(yù)先在低結(jié)合板中加入酶標(biāo)抗體和樣品,之后再用排槍將所有樣品快速轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板中進(jìn)行孵育。這樣可以有效減少不同孔加樣的時(shí)間差,確保所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致,進(jìn)而降低異常值出現(xiàn)的概率。 案例二 同一個(gè)方向洗板造成的誤差 如果4次洗板都是同一個(gè)方向加入洗液的話,也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。以下熱圖示例展示了4次洗板都是用排槍按照1到12列加入洗液可能發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 B 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 C 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 D 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 E 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 F 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 G 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 H 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 改進(jìn)辦法:建議采用交替方向的方式洗板,也就是第1和3次洗板與第2和4次洗板要從相反的方向加入洗液。 五 HCP ELISA結(jié)果異常案例與問(wèn)題排查 如下圖所示,該檢測(cè)結(jié)果樣品復(fù)孔之間出現(xiàn)自左向右的降低的趨勢(shì),且孔板右側(cè)的陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照的OD值都比左側(cè)低。通過(guò)兩側(cè)陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果不一致可以判定此次實(shí)驗(yàn)是失敗的。此外,左側(cè)陰性對(duì)照復(fù)孔之間OD值的平均差異為0.01,而右側(cè)陰性對(duì)照的OD值則接近背景水平,因此還需更多信息來(lái)進(jìn)一步判斷問(wèn)題來(lái)自加樣還是洗板。 綜上所述,本次實(shí)驗(yàn)失敗的原因可能為:1、加樣太慢;2、洗板沒(méi)有交替方向的操作。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A STD 1 Sample 1 Dilution 1 Sample 3 Dilution 1 Sample 5 Dilution 1 B STD 2 Sample 1 Dilution 2 Sample 3 Dilution 2 Sample 5 Dilution 2 C STD 3 Sample 1 Dilution 3 Sample 3 Dilution 3 Sample 5 Dilution 3 D STD 4 Sample 1 Dilution 4 Sample 3 Dilution 4 Sample 5 Dilution 4 E STD 5 Sample 2 Dilution 1 Sample 4 Dilution 1 Negative Control (Diluent) F STD 6 Sample 2 Dilution 2 Sample 4 Dilution 2 Control Dilution 1(External HCP) G STD 7 Sample 2 Dilution 3 Sample 4 Dilution 3 Control Dilution 2 (External HCP) H STD 8 Sample 2 Dilution 4 Sample 4 Dilution 4 Postive Control (STD 5 repeat) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 2.500 2.450 2.400 1.200 1.150 1.100 2.000 1.950 1.900 1.700 1.650 1.600 B 1.200 1.150 1.100 0.600 0.550 0.500 1.000 0.950 0.900 0.850 0.800 0.750 C 0.600 0.550 0.500 0.300 0.280 0.260 0.500 0.480 0.460 0.425 0.405 0.385 D 0.300 0.250 0.200 0.150 0.140 0.130 0.250 0.240 0.230 0.212 0.202 0.192 E 0.150 0.130 0.110 1.400 1.350 1.300 0.125 0.115 0.105 0.005 0.005 0.005 F 0.075 0.065 0.055 0.700 0.650 0.600 0.550 0.500 0.450 0.230 0.225 0.220 G 0.038 0.033 0.028 0.350 0.330 0.310 0.290 0.270 0.250 0.115 0.095 0.075 H 0.015 0.010 0.005 0.175 0.165 0.155 0.145 0.135 0.125 0.090 0.080 0.070 總結(jié) ? 在ELISA實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)該合理規(guī)劃孔板布局:優(yōu)化的孔板布局能夠監(jiān)測(cè)關(guān)鍵性能指標(biāo),并在出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)更快地進(jìn)行問(wèn)題排查。更多布板示例請(qǐng)點(diǎn)擊這里獲取。 ? HCP ELISA的關(guān)鍵考慮因素包括:復(fù)孔設(shè)置、樣品稀釋梯度、加樣和洗板的操作、對(duì)照的設(shè)置。 ? 用低結(jié)合板來(lái)優(yōu)化加樣操作,可以最大程度減少OD值的偏差。 ? 切勿使用空白對(duì)照,這樣做會(huì)提高檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)。 相關(guān)產(chǎn)品推薦: 品名:Sample Treatment Plate (樣品處理板) 貨號(hào):F402 規(guī)格:1 plate Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過(guò)50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過(guò)25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來(lái)西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.laixt.com了解更多信息。 更多>

AppliChem低內(nèi)毒素原料:為降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)保駕護(hù)航

西美杰代理PanReac AppliChem 作為擁有百年歷史的歐洲生物化學(xué)試劑與制藥原料生產(chǎn)商,專注提供低內(nèi)毒素原料,可有效降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)。其產(chǎn)品符合 USP、EP、JP、ChP 等多國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn),具備超低內(nèi)毒素水平、嚴(yán)格質(zhì)量控制及批次一致性,為科研人員、制藥企業(yè)及培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)提供可靠支持,助力保障藥品安全性與工藝穩(wěn)定性。 更多>

新品推薦 | 肌肉生長(zhǎng)抑制素檢測(cè)試劑盒

Immundiagnostik(IDK)德國(guó)進(jìn)口肌肉生長(zhǎng)抑制素檢測(cè)試劑盒(貨號(hào) KR1012),采用酶聯(lián)免疫法,可定量測(cè)定人血清、EDTA 血漿中肌肉生長(zhǎng)抑制素含量,樣本量?jī)H需 20μl,標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍 0.4-32.5ng/ml,96T 規(guī)格滿足實(shí)驗(yàn)需求。該試劑盒適用于骨骼肌生長(zhǎng)調(diào)控、肌肉減少癥等相關(guān)研究,屬科研專用(RUO)。作為 IDK 中國(guó)代理,北京西美杰科技提供完善技術(shù)支持與售后服務(wù),助力科研人員高效開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。 更多>

about us關(guān)于我們

西美杰介紹

北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡(jiǎn)稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念,勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

brand代理品牌

在線客服

我們的營(yíng)業(yè)時(shí)間: 8:30-17:30

  •   北京客服1
  •   北京客服2
  •   上海客服
  •   成都客服
  •   廣州客服
成人在线播放视频网址,一区二区不卡网视频.,免费观看的日本视频,欧美丰满少妇人妻hd高清在线,在线观看视频日韩精品,夫妻性生活视频日白,在线看亚洲中文av,青青草这里都是精品,亚洲综合av自拍盛宴 在线观看免费欧美精品,亚洲av日韩在线看,蜜桃av亚洲一区二区,深夜久久久久久久久久久久有,av网站直接看中文字幕亚洲一区,美女在线一区二区视频,日韩高清动漫在线观看,丰满少妇被狠狠插入,亚洲免费观看一区二区 黄色激情视频一级人妻,天堂在线 在线天堂,亚洲欧美一区二三区,女生阴道出现流黄脓,69久久69久久免费精品小说,特黄a区毛片一区二区,日本精品久久久久亚洲三区伊人,99免费精品在线观看,天堂网在线热播视频 色日韩视频在线观看,不卡免费av在线观看,操逼鸡巴视频啊啊啊啊啊不要操了,亚洲天堂高清视频入口,国产精品国产三级国产av闹,亚洲成人黄色精品网址,欧美成人性生活久久久,夜晚在线视频你懂的,美女大学生激情91 亚洲天堂大香蕉久久,富婆饥渴难耐一二区,国产艺术片在线观看一区av,人妻精品一区二区三,18禁国产精品久久久久久免费,av天堂亚洲国产av,色呦呦在线资源网站,人妻师生制服丝袜另类,九九色在线观看视频 精品人妻专区在线视频,成年人在线观看的视频,久久青青视频免费看,欧美精品久久17c,高清一区二区二区三区,亚洲欧美字幕中文网,一区二区中文字幕在线中文字幕,成人免费看黄在线播放,日韩精品在线视频聊天
日本放荡的熟妇在线 狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠 韩国18禁在线电影 国语精品91自产拍在线观看一区 天天操天天插天天骑 亚洲色图在线观看视频一区二区
大色网小色网大香蕉 免费在线播放不卡av 亚洲欧美不卡高清在线 91在线观看视频网 巨乳人妻中文字幕在线 精品无码国产自产在线观看水浒传
亚洲中文字幕在线av 吃奶一区二区三区免费 黑人操日本丝袜美女 国产午夜免费啪啪啪 伊人久久大香色综合 日韩一级特黄高清免费
一区二区在线播放日韩 蜜桃视频在线观看免费 九九热超在线视频精品 久久久在线观看一区二区 在线精品亚洲一区二区 国产三级农村妇女在线 久一色屋精品视频在线观看 一级特片内射视频播放 国产精品爱久久久久久久电影 日本视频一区二区三区1 国产精品综合久久久久久妇女 成人黄色三级免费网站 欧美亚洲变态另类在线观看 国内人妖一区二区在线播放 久久精品久久久久久噜噜 亚洲图片小说综合激情文 呻吟丰满一区二区三区 亚洲av乱码一区二区三区了 日本一区二区视频免费在线 日本午夜一二三区在线观看 国产亚洲一区电影在线观看 女同亚洲一区二区三区精品久久 亚洲成a人ⅴ欧美综合天堂 中文字幕一二三四不卡区 日韩av在线直播一区二区 91国产av在线免费观看 九九热精彩视频在线免费 欧美日韩国产一区二区精品 欧美亚洲精品一区二区在线 久草青青青在线视频观看中文 国产suv精品一区二区6 黄色网色网色网色网色网色网色网色网 一区二区三区av夏目彩春 久久久久综合激动五月天 精品一区二区亚洲一区二区血恋 韩国三级做爰视频韩世雅 亚洲av影片狼色在线影院 欧美精品日韩精品亚洲精品 日本中文字幕在线视频免费观看 欧美久久久久一区二区三区 欧美综合激情一区二区三区 国产片黄色片久久麻豆91 精品综合亚洲中文字幕 后入老师在线观看视频 中文字幕乱码视频一区二区 亚洲精品自拍偷拍一区二区 亚洲爱爱黄片一区二区三区 精品亚洲免费久久久久 日韩精品专区一区二区 精品视频一区二区在线观看免费 91麻豆国产福利免费片 日本电影中文字幕一区二区 欧美极品一区二区三区 亚洲欧美日韩另类精品一区二区三区 国产 欧美 日韩 综合 久青青草视频手机在线免费观看 欧美一区二区三区久久精品视 精品人妻一区二区三区伊人 国产亚洲精品麻豆一区二区 日本一区二区免费欧美 欧美日韩一区二区高清 欧美一区欧美二区欧美三区 久久国产精品男人的天堂 欧美一区二区三区91 日韩色视频第一集在线观看 亚洲午夜久久久精品国产电影 深夜A级毛片免费视频 日本高清精品视频在线观看 久久99亚洲精品久久视频 日韩视频一区二区三区在线 欧美和日韩在线不卡视频 亚洲一区二区在线网址 国产精品亚洲欧美精品 国产三级久久久久伦理 亚洲一区中文字幕制服丝袜人妻 久久精品中文字幕一区二区三区 国产成人av电影网站在线看 精品人妻久久久一区二区三区 高潮一区二区三区久久亚洲 亚洲午夜福利电影在线播放 精品国产一级二级三级 精品成人佐山爱一区二区 国产欧美日韩一区二区三区 97视频在线观看精品在线 91久久久久久人妻精品 91天天操狠狠操夜夜操 水蜜桃视频一区二区在线观看 人人妻人人人澡人人爽欧美一区 日韩综合精品一区二区 欧美成人吃奶水高清在线 蜜桃产品一区一区三区在线 在线视频日韩精品一区二区 亚洲精品在线观看二区 少妇夜夜春夜夜爽试看视频 精品少妇天天爽天天做 日韩亚洲欧美久久精品 欧美日韩无中文在线视频 国产三级精品三级在线播放 中文字幕乱码免费高清 久久免费一区二区三区四区 中文字幕中文字幕在线中文字幕 麻豆国产高清精品国在线 91偷拍精品福利视频 120分钟内射视频 久久国产精品男人的天堂 97人妻人人澡人人添人人爽 亚洲天堂精品区三区二区一区 国产激情久久久久影院蜜桃av 银行显示身份信息黄码 国内精品亚洲电影一区 日本一区二区高清日韩 日韩欧美国产一区在线观看 一区二区日韩电影在线观看 日本不卡高清三区四区 亚洲每天色在线观看视频 亚洲av伊人久久综合网站 青青草国产美女自拍视频 中国色图欧美精品色视频 国产野战无套av毛片黑人 亚洲图片日韩色图日韩色图日韩 亚洲欧美国产精品999 av免费观看亚洲一区二区 日韩av一区二区三区亚洲 国产一区二区三区精品99久久 精品人妻一区二区三区狠狠 国产一级黄色性生活片 欧美精品久久久久久久久 北条麻妃精品一区二区三区 天天日天天射天天操天天干 99久久亚洲综合网精品 粉嫩av一区二区在线观看 日本在线免费观看午夜视频 99国产成+人+综合+亚洲 欧美 一本一本久久a久久精品综 青青草免费手机直播视频 亚洲av正片一区二区三区 亚洲欧美日韩中文字幕精品国产 极品av麻豆国产在线观看 久久这里都是精品一区 精品人妻一区二区三区久久九九 日本中文一区二区在线 中国免费av一区二区 亚洲天堂精品在线观看 国语自产精品视频在线不卡 日韩精品视频高清在线 黑人人妻av一区二区三 少妇熟女一区二区三区aⅴ 欧美高清在线不卡视频 亚洲国产成人不卡高清麻豆 在线亚洲免费精品视频 国产精品一区二区三区专区 国产精品一区二区在线观看91 国产三级精品三级在线播放 国产日韩欧美一级电影 国产美女主播在线一区 一区二区三区在线观看网站蜜桃 中国精品一区二区三区久久毛片 欧美日韩在线精品一区 在线观看日本电影一区二区 欧美色视频日本片高清在线 欧美一级特黄大片做受配牛男人 亚州一区二区三区在线视频 精品在线观看视频二区 国产亚洲青春草在线视频 国产高清在线视频不卡 精品国产一区二区三区三州 亚洲午夜国产精品夜夜嗨av 野花在线中文字幕伊人 尤物国产在线精品福利三区 久久亚洲精品在线免费视频 国产果冻一区二区日韩 亚洲av午夜精品久久 日本欧美久久一区二区 久久久久精品一区二区三区四区 亚洲精品少妇一区二区 精品视频一区二区日本 色8久久精品久久久久久 日韩午夜福利影视在线 国产极品人妖在线观看 欧美日本精品一区二区 国产欧美日韩va另类在线播放 精品国产一区二区在线视 久久99日本免费国产精品 色涩一区二区三区四区 男性一插就想射是因为啥 日韩精品一区二区久久 青青爽精品在线分类视频 青青操国产91久久久网站 亚洲一区二区精品17c 99久久久久精品国产免费麻豆 国产一区二区三区国产一区 亚洲成av人片精品久久久久久 亚洲另类欧美日韩精品综合 2012天天操夜夜操狠狠操 中文字幕人妻少妇av 蜜桃视频在线网站免费观看 2021国产精品福利 色综合久久久久久久久久五月 熟女丝袜偷窥自拍露脸亚洲 国产果冻一区二区日韩 国产成人久久久久婷婷 ccyyccyy草草影院 亚洲熟妇av一区二区三区色堂 北岛玲视频免费看1区2区 久久亚洲精品中文字幕二区 国产三级国产精品国产a 日本美女黄色一级视频 日本免费不卡一二三区观看 国产有码在线观看999 日韩精品人妻av一区二区 色婷婷国产精品视频一区二区保健 日本精品久久久精品三18 69精品御姐免费黄色大片 欧美hd一区二区三区 日本一区二区三区四区在线播放 美女久久久高潮免费视频 亚洲欧美精品一中文字幕 五月婷婷丁香六月在线 国产日韩中文字幕在线观看 美女作爱国产作爱国产 菲菲影院亚洲一区二区 国产日韩一区二区电影 在线欧美日韩激情一区二区三区 欧美日韩国产中文字幕一区 亚洲精品成人久久久nv 日本一区二区三区视频在线看 69精品人妻一二三区蜜桃 精品国产亚洲av蜜臀 国产福利在线不卡视频 亚洲国产精品中文字幕自拍 日韩一级黄色片在线观看 91超黄超污大片在线观看 一区二区三区国产色综合 韩国欧美日本国产在线观看一区 怡红院怡春院视频免费看 欧美精品亚洲色图视频免费 日韩一区二区三区中文字幕 中国精品偷拍厕所视频一区二区 日av中文字幕人妻系列 激情亚洲精品在线观看 日韩伦理中文字幕在线一区 午夜福利小视频在线看 99国产亚洲精品视频 欧美一区二区三区v11v 91中文字幕精品一区二区 免费观看欧美日韩另类视频 日韩色爽视频免费观看 国产一区二区三区三级电影 亚洲免费精品一区二区 91亚洲午夜精品久久久久久 欧美午夜人妻免费爽爽爽 国产极品人妖在线观看 蜜桃久久精品一区二区三区 中文字幕34一区二区 国产精品美女三级视频 适合初中生看的国产电影 久久99久久久久久精品 国产又粗又长又猛又爽 青青草手机成人自拍视频 日本免费不卡一区二区视频 国产极品人妖在线观看 草草影院免费观看视频 精品国产一区二区三区香 99精品国产热久久cao三级 日韩欧美精品一区二区三区在线 欧美激情视频在线网址 成人亚洲一级午夜激情网 久久青青草这里只有精品 永久免费av网址在线观看 激情综合伊人99亚洲婷婷 日韩一区二区av电影 日韩高清一区二区不卡视频 国产手机av免费在线观看 国产一区二区日韩精品欧美精品 在线观看国产成人av天堂不卡 亚洲激情一区二区三区不卡 久久免费看的少妇一级特黄片 国语自产精品视频在线不卡 国产又粗又硬又长又爽 国产综合中文字幕不卡 漂亮邻居人妻被强中文字幕 一区二区三区精品偷拍 日韩欧美精品视频一区二区 日韩和欧美的一区二区电影 精品久久国产一区二区三区 国产片精品一区在线观看 人妻中文字幕一区二区免费 人妻露脸一区二区三区 久久久亚洲av动漫 日本不卡二区高清三区 夜夜爽一区二区三区四区 亚洲精品啊啊啊啊啊啊视频 少妇熟女一区二区三区四区 日韩一区二区三区北条麻妃 深夜A级毛片免费视频 亚洲乱色熟女一区二区三区小说 午夜国产三级另码视频 亚洲aⅴ毛片一区二区三区 欧美日韩亚洲激情中文字幕 国产精品久久久久久妇女 中文字幕日韩欧美一区二区三区 青青草97国产精品免费观看 国产精品女同一区二区 警花av一区二区三区 污色网站在线免费观看 日韩人妻系列一区二区三区 亚洲熟女av超清一区二区三区 国产自产二区三区精品 深夜福利免费看片网站 色视频免费观看在线播放 丝袜美腿诱惑福利视频 最新日韩不知道卡在线 中国人BBWBBW高潮 日本丰满妇人成熟免费中文字幕 人人爽人人澡人人人妻精品 在线观看丝袜美腿视频 日韩精品国产二区三区 又白又爽的视频在线观看 日本一欧美一欧美一亚洲 97精品人妻一区二区三区麻豆 日本免费在线一二三区 蜜桃在线视频成人在线视频 国产精品国产国产av 夜夜爽一区二区三区四区 亚洲午夜av久久久精品 亚洲一区二区不卡日韩 青青草免费手机直播视频 三上悠亚亚洲一区二区 日韩高清av在线观看视频 五月开心婷婷极品激情 日韩欧美好看的电视剧电影网站 国产自拍激情视频在线 少妇熟女一区二区二三区 黄三级一条狍和女人视频 免费一级三级黄色片子 日韩欧美精品有码一区 国产精品亚洲av三区国产毛片 亚洲中文国产一区二区 国产人成在线播放最新网址 日本免费大片一区二区 亚洲欧美一区综合精品狠狠爱 国偷自产av一区二区三区91 黄色av网站免费进入 日韩最新视频一区二区三 91久久婷婷人人澡人人澡 亚洲 一区 二区 精品 国产免费海量刺激视频污的 久久日韩精品一区二区 亚洲最新一区二区在线 女同国产日韩精品在线 国产精品小姐久久久久久 亚洲一区二区三区四区黄 久久精品国产亚洲av三区 亚洲长长久久一区二区三区 成人综合国产一区二区三区 岛国av一区二区精品 偷拍女厕尿尿在线免费看 黄色av免费软件下载 日本最新免费不卡二区 男女男精品视频网站免费看 最新中文字幕av不卡在线 亚洲阿天堂一区二区三区 久久精品国产亚洲av四区 涩涩鲁精品亚洲一区二区 亚洲国产精品国自产拍性色 蜜臀美女视频综合久久 色老久久精品免费视频 日韩新片一区二区不卡 国产性色av大片免费看的 91社区免费福利区体验一分钟 色婷婷一区二区精品一区二区三区 成人亚洲国产精品一区不卡 亚洲三级一区二区三区四区 欧美高清视频一区二区在线观看 亚洲性图免费视频无套内射 国产密臀av在线一区尤物 国产vedose精品一区二区 禁天堂一区二区三区精品 熟妇人妻久久中文视频 九九爱视频在线免费观看 日韩在线免费电影一区二区 日韩一区二区三区的视频 日本老熟妇一区二区三区 国产精品一区二区三区网址 黄色av免费观看网站 不卡的中文字幕在线观看 在线观看国产成人av天堂不卡 色视频免费观看在线播放 夜夜操夜夜操天天操天天操 日韩精品成人自拍视频在线观看 2012高清中文字幕版日本 久久丁香综合五月国产三级网站 亚洲av永久一区二区 日本精品一区久久久久久 午夜精品短视频在线观看 国产高清在线一区二区不卡 国产又大又长又粗又硬爽 日本888888888视频 国产精品久久久久久久亚洲 男性一插就想射是因为啥 欧美丰满熟妇bbbb 亚洲综合色一区二区三区 欧美精品日本一区二区 日韩欧美亚洲一二三区 亚洲天堂av免费在线观看 日韩精品一区二区三区亚洲 欧美亚洲韩国日本黑白陪 国产富婆一起二区三区 国产日韩精品一区二区三区 亚洲中文字幕女同系列av专区 欧美在线观看视频一卡二卡 人妻有码系列中文字幕专区 久久一区二区三区少妇人妻 午夜丰满性感少妇打炮视频 日本日本一区二区高清电影 厕所极品偷拍一区二区三区视频 中文字幕日韩av六区在线播放 国产精品国产三级国产一区 黄色在线观看无打码 亚洲一区三区四区在线观看 草b视频在线免费观看 午夜鲁丝一区二区鲁丝久久久 欧美日韩人人模人人爽人人喊 夜夜嗨天堂精品一区二区 精品精品久久久久久久 日本一区二区精品在线观看 欧美精品一区二区日本 91久久精品国产性色也 亚洲欧美综合另类久久久精品 青青草高清视频在线播放 日韩精品人妻中文字幕一区 国产一区二区三区色成人 国产一区二区欧美日韩 日韩精品免费一区二区三区竹菊 日韩成人激情视频免费观看 色综合久久超碰色婷婷 亚洲无人区午夜福利码高清完整版 国产精品免费久久久女人 国产精品99久久99久 懂色一区二区二区av免费观看 亚洲免费一区二区三区视频 最刺激的欧美三级中文字幕 一本久道免费中文字幕 亚洲av综合色区一区二区偷拍 av网站在线观看日韩 深爱激情开心久久婷婷 欧美91精品国产自产在线 中文字幕人妻一区二区免费 999精品一区二区三区 成人在线日韩欧美有色电影 欧美人与动性zozozo 日本最新免费不卡二区 日韩电影日韩欧美精品 一区二区三区精品婷婷 在线日本免费一区二区 91国产自拍免费视频 日韩亚洲一区二区在线 欧美不卡不码视频免费高清 最近中文字幕高清中文字幕第一 日韩色在线观看免费视频 日韩高清视频一区二区 日韩精品99一区二区高清 日本午夜免费在线视频 国产又粗又长又爽视频 国产最新三级在线观看 av一区二区日韩电影 激情男人五月天中文视频 国产欧美日韩va另类在线播放 欧美激情一区二区日本 青草青草亚洲一区二区三区 色偷偷久久久精品亚洲 最新国产视频精品97 国产美女久久久亚洲综合 国产精品小粉嫩在线观看 亚洲国产综合久久久精品网站 日本一区二区偷拍视频 免费视频亚洲一区二区三区 欧美精彩一区二区三区 很黄很黄的一区二区三区 久久亚洲精品中文字幕二区 亚洲精品中文字幕二区 亚洲国产精品日韩在线观看 久久国产亚洲精品成人 在线观看精品91福利 夜燕白电视剧免费观看全集 国产精品一区二区三区网站视频 未成年禁看视频在线观看 91国产精品高清在线 日本不卡在线视频一区 亚洲天堂免费一二三四区 美女大尺度内部福利视频 女同一区二区三区不卡免费 国产一区二区丰满熟女人妻 国产自拍激情视频在线 国产精品国三级av品爱网 18禁污污污网站在线免费看 国产日产亚洲系列最新 中文字幕女同女同女同 国产精品999在线观看 日韩欧美一区二区在线插播 亚洲欧美日韩免费一区二区 亚洲精品中文字幕观看 久久精品日日躁夜夜躁人妻 国产福利主播一区二区 亚洲啪啪av一区二区 欧美96一区二区三区 人人妻人人爽人人澡91 精品少妇一区一区三区 欧美一区二区三区在线精品观看 女同性恋伦理片在线看 成人a免费大片在线看 日韩有码在线观看不卡 欧美高清在线观看一区二区 欧美熟妇与小伙性欧美交 亚洲一区深夜免费视频 后入视频国产在线观看 国产国产乱老熟女视频网站 日韩精品一区二区视频 日韩亚洲欧美在线免费播放 密臂av一区二区三区 日韩一级视频一区二区 亚洲国产国语对白在线在线视频 福利热在线视频精品19 高清不卡日本v二区在线 亚洲一级特毛在线观看 欧美亚洲国产精品一区二区 日本高清视频啪一区二区 久久青青草这里只有精品 国产精品97久久久久久a 免费永久在线看黄网站 久久精品国产亚洲杨幂 国产激情久久久久成熟影院 成人精品av一区二区三区网站 日韩精品一区二区三区免费 亚洲精品激情久久小说 丰满少妇被粗大猛进人高清 亚洲精品自拍偷拍一区二区 亚洲国产欧美在线日韩一区 日韩一区二区在线欧美 高清一本之道加勒比在线 国产西西裸体一级黄色大片 国产成人97精品免费看片 日韩毛片免费日韩免费毛片 av天堂中文一区二区三区 亚洲激情一区二区三区在线 国产精品视频免看一级a 色8欧美日韩国产无线码 国产黄a三级三级三级老师绑 中文久久精品一区二区三区 夜夜草av一区二区三区 淫妇激情av一区二区三区 91成人精品国产刺激国语对白 国产精品一品二区三区四区18 午夜影院在线观看5分钟 欧美少妇三级三级在线观看 欧美精品亚洲视频在线观看 国产毛片av一区二区三区四区 国产精品亚洲va在线观看日本 亚洲精品av一区二区国产 亚洲欧美日韩另类小说图片 2022亚洲国产精品自拍 日韩欧美另类一区在线观看 国产一区二区电影免费看 91精品国产色噜噜综合 日本东京热高清色综合 日韩欧美国产中文字幕电影 五月婷婷六月丁香狠狠干 久久久亚洲av动漫 亚洲国产高清精品一区二区三区 欧美日本大陆一区二区 亚洲精品乱码久久久最新版 日本在线播放视频一区二区 国产精品国产成人生活片 亚洲精品一区二区三区午夜 国产精品一区二区av白丝 国产三级精品三级在线播放 国产一区二区精品久久99 国产人妖高清一区二区在 国产成人三级四级视频 精品国产一区二区三区麻豆仙踪林 国产高清一区在线观看 人人妻人人澡人人爽少妇 国产又粗又长又硬又爽 欧美成人一区二区免费视频 国产黄色a三级三级看三级 国产三级在线免费看片 国内真实不卡视频在线 日韩精品诱惑一区?区三区 极品翘臀后入在线观看 久久国产精品亚洲欧美阿娇 国产免费的视频一区二区 国产精品一区久久精品国产 日本熟妇的诱惑在线观看 96视频精品全部免费品 av电影网站区一区二区三 91精品美女高潮喷水久久久久 国产一区二区三区很黄很爽 久久精品国产一区二区三 国产又粗又长又黄又猛又爽视 久久精品亚洲欧美成人影院 国产成人精品久久久成人 日本一区二区在线网站 伊人一区二区三区四区黄片 日本一区二区三区av 中文字幕日韩精品免费小视频 日韩欧美一二三在线观看 中文字幕午夜人妻久久一区 久久久久久久久精品久 国自产偷精品不卡在线 亚洲欧美伦理激情在线 自拍偷在线精品自拍偷99九色 国产精品久久99简爱亚洲 国产精品久久久久精品三级人 日本高清视频啪一区二区 亚洲图色视频在线观看 免费国产亚洲一区二区 国产亚洲白白色发布免费 亚洲欧美日韩欧美精品高潮 999久久久久国产精品麻豆 欧美亚洲一区二区精品 亚洲91精品一区二区三区 国产欧美一级一级一级片 88欧美日韩精品射精合集高潮 日日碰狠狠添天天爽不卡 国产综合欧美日韩在线精品 日韩成人黄片免费观看 999国产精品一区二区 日产欧美日韩综合精品一区二区 五月婷婷六月丁香婷婷 亚洲高清一区二区高清 日韩 欧美 精品 在线 日产国产精品一区二区 色网色网色网色网色网 一区二区三区四区亚洲综合 中文字幕色偷偷人妻久久一区 国产人妖网站在线视频 日韩一区二区三区视频播放 中文字幕色偷偷人妻久久 日韩精品中文字幕影院 亚洲中文字幕永久在线全国 亚洲视频精品一区二区三区 裸体日本电影一区二区三区 在线国产精品自偷自拍 亚洲精品1区2区在线观看 亚洲精品av一区二区国产 婷婷激情五月天亚洲色图 成人国产激情自拍视频 国产精品亚洲在线播放 成人全视频在线观看免费播放 亚洲国产高清在线视频 国产精品九九久久久久久久 免费国产亚洲一区二区 自拍偷拍亚洲视频欧美视频日韩 亚洲中文日韩一区二区三区 天天干夜夜操操操操操 亚洲一区二区人体艺术视频 国产亚洲精品色婷婷97久久久 欧美亚洲一区二区三区高清免费 国产福利不卡视频在线 综合av一区二区三区 日本到在线高清视频观看 国产系列在线亚洲视频网站 亚洲中文字幕在线看一区二区 中文人妻熟女乱又乱精品 真实国产老熟女无套中出 精品久久亚洲一区二区av 国产精品综合一区久久久久久久 国产女主播19在线观看 国产精品色综合女av 国产剧情av巨作精品原创 国产精品十八禁一区二区 97人妻人人澡人人添人人爽 日本激情视频在线观看 人妻操人妻爽人妻精品 人人妻人人澡人人揉人人捏人人 97se亚洲精品一区二区 日韩欧美精品视频一区 亚洲日本欧美日韩一区二区 欧美精品国产动态日本图 av最新天堂资源在线 中文字幕一区二区人妻痴汉电车 五月的婷婷六月的丁香 国内亚洲欧美一区二区三区 久久精品亚洲热综合一本色婷婷 日韩偷拍视频一区二区 亚洲地址一区二区三区四区 日本护士恋夜全部视频列表 麻豆视频在线观看播放 亚洲天堂网中文字幕精品一区 色六月婷婷六月久久六月 人妻熟女的高跟丝袜艳遇 久久黄色成人精品网址 视频精品亚洲一区二区 一级一片内射在线播放 久久久久国产综合精品 日本第一区二区三区视频 亚洲国产成人精品女人久 亚洲欧美一区二区三区孕 国产精品久久一区二区蜜桃 日本不卡一区高清二区 国产三级精品三级在线三区 成人性生交大片免费看l 男男免费在线观看网站 国产精品国产三级国产有无 亚洲欧洲精品成人久久曰 日本美女丝袜诱惑一区二区三区 免费久久久一本精品久久区 欧美日韩一区精品二区 第一页在线精品中文字幕 伦理影院在线免费观看 亚洲精品自拍偷拍一区二区 日韩欧美不卡一区二区不卡 一区二区高清视频在线观看 国产日韩欧美一二三区 黄色av 免费在线观看 久久婷婷色香五月综合缴缴情 久久久亚洲女精品aa 青春草免费在线观看视频 日韩 精品 一区二区 久久精品碰国产97区 国产又粗又长又猛又爽 百合av一区二区三区 日韩综合网一区二区三区 97超视频观看免费观看 国产精品69电影免费观看 国产精品亚洲专区一区二区 午夜黄色影院在线观看 成人午夜视频免费看黄 亚洲香蕉精品刺激一区二区 91久久精品国产性色tv 成人av免费观看黄色 亚洲经典一区二区三区 日本免费不卡一区二区视频 91精品国产高清久久久久久亚洲 黄色av成人生活免费观看 黄色网色网色网色网色网站 国产亚洲精品久久久9 中文字幕乱码精品在线观看 天天干夜夜操狠狠插用力撞 在线观看免费无码a片视频 二区视频在线免费观看 3atv中文字幕在线不卡 久久av免费一区二区观看 99久久免费国产精品四虎 国产专区制服诱惑中文字幕 日本精品无人区1区2区3区 嫩模精品视频在线观看 天天操夜夜操狠狠操av 日韩精品熟妇一区二区三区 国产日韩欧美黄色美女视频 日本免费在线一区二区观看 欧美人与牲禽动交精品一区 亚洲无人一区二区蜜桃 国产成人av一区二区三区在线 国产精品 大秀视频 欧美激情 色悠久久久久综合网香蕉 亚洲女同一区二区在线观看 精品高潮久久久久久久久 亚洲日本在线中文字幕dvd 亚洲欧美一区二区三区久久蜜桃 中文字幕不卡欧洲综合公司 国产欧美亚洲精品a第一页 日韩中文字幕亚洲精品一 国产精品天堂蜜av在线播放 国产日韩欧美在线精品视频 丁香六月色婷婷亚洲激情 97se亚洲国产综合自在线观 中年丰满熟妇全程露脸 亚洲激情一区二区三区在线 一区二区三区日本精品 国产一级黄片久久免费看 精品国产伦一区二区三区a 91蜜桃视频免费在线观看 日韩精品视频高清在线 国产一区二区三区很黄很爽 日韩午夜福利影视在线 日本一区二区三区免费观看视频 色蜜国产av剧情一区二区 最新亚洲视频一区二区 亚洲韩国日本欧美综合一区 大型黄色av网站在线播放 国产日本韩国三级视频 久久99精品一区二区毛片 欧美日韩亚洲电影在线观看 国语两性对白视频在线看 欧美日韩欧美日韩在线观看视频 国产在线播放一区二区三区四区 亚洲第一区欧美国产日韩精品 亚洲精品国产精品乱码涩涩 亚洲免费精品一区二区 开心五月婷婷激情在线 手机在线一区二区三区电影 亚洲hd高清在线一区二区 国产精品97久久久久久a 综合久久一区二区三区 精品久久久久久久久入口 在线中文字幕亚洲精品 日韩伦理中文字幕在线一区 日本精品不卡在线观看 精品日韩一区二区电影 色综合久久久久金八天国四虎 国产亚洲av一区二区三区 国产福利91精品张津瑜 日本不卡一本二本三区 国产成人91亚洲精品 丁香激情五月中文字幕亚洲 国产精品天天操夜夜操 av毛片在线免费播放 日本激情视频高清久久 亚洲色图视频一区中文字幕 在线观看中文字幕不卡av 亚洲av高清一区二区三区色 日韩高潮喷水一区二区三区 日韩激情专区视频在线播放 98国产一区二区三区 av黄色成人在线观看 在线免费观看亚洲黄色av 九九热在线视频免费观看 国产免费的视频一区二区 亚洲精品偷拍自综合网 日本不卡一区高清二区 综合午夜福利中文字幕人妻 亚洲午夜av福利久久一区 日韩三级视频一区二区 久久久久午夜电影网av 上原亚衣女同在线观看 一二三区亚洲免费电影 午夜一区二区三区视频 丝袜美腿中文字幕激情综合色 2023天天操夜夜操 亚洲欧美综合区丁香六月 九九视频在线观看免费专区 久久欢久久精品久久久 中文字幕日韩有码一区 一区二区亚洲精品国产 亚洲综合中文字幕68页 免费在线观看日韩视频 亚洲一区二区三区凹凸色 亚洲色图在线免费视频观看 久久国产精品99精品国产 日本刺激视频一区二区 国产精品一区二区 蜜臀av 国产有码在线观看999 蜜臀久久综合一本av 欧美精品一区二区不卡在线 欧美日韩一二三区在线视频 精品亚洲一区二区三区91 日韩av中文字幕在线一区 国产精品久久三级三级 国产精品色午夜在线观看 a级全黄又爽又黄的网站 九九熟这里只有精品视频 欧美日韩午夜在线视频 国产精品国产三级在线试看 久久九九热这里都有伊人 国产五月天视频在线观看 久久精品亚洲小说区图片区 国产三级一区二区三区在线视频 97久久久国产精品爽 亚洲最新av一区二区三区 精品久久av免费一区二区三区 日本免费欧美一区二区三区 精品三级国产电影一区 狠狠精品久久久噜噜中文字幕 扒下语文老师的丝袜美腿 亚洲一区二区三区在线视频免费 精品久久精品久久精品 国产99精品久久久久久 久久99日本免费国产精品 久久亚洲国际午夜精品理论 久久久精品999精品日本 国产视频一区二区三区在线免费 日韩午夜三级在线视频 日本一区二区三区日本视频 久久精品免费视频精品视频 日韩 在线 一区二区 午夜福利小视频在线看 超清中文乱码字幕在线观看 人妻97日韩精品中文字幕 99久久久国产精品蜜臀 久久最黄性生活又爽又黄特级片 牧村彩香一本精品久久久 亚洲国产综合精品一区最新 在线视频图片专区小说专区 国产精品久久久成人av 中文字幕乱码亚洲无限码 亚洲性色精品一区二区 国产性色av大片免费看的 日韩丰满少妇一区三区 悠悠成人资源亚洲一区二区 亚洲人成亚洲精品伦理 婷婷色综合成人成人网小说 日韩成人福利视频在线观看 ccyy草草影院国产电影 国产亚洲午夜精品久久久 人成午夜高潮免费手机视频 国产人妖在线视频一区二区 日韩国产自拍精品在线 亚洲国产精品av久久久网站 欧美啪啪一区二区三区h 最近更新中文字幕高清不卡 综合午夜福利中文字幕人妻 色视频网站一区二区三区 国产成人精品综合久久久看 亚洲精一区二区三av 男女无套免费视频网站 一区二区三区的视频在线观看 青青操逼喔嗯啊使劲视频 狠狠干欧美亚洲第一成人 大屁股流白浆一区二区 国产三级国产成人国产精品 亚洲午夜日韩在线观看 国产口爆av一区二区三区 亚洲毛片高清免费视频 91精品天堂福利在线观看漫画 日韩免费电影一区二区 精品一区二区三区四区免费av 美女扒开腿露内裤免费看 av最新天堂资源在线 在线视频精品网址中文字幕 国产熟女激情高潮视频 国产精品一区二区在线欢 亚洲欧美一区二区三区四区五区 中文字幕日韩欧美就去鲁 精品久久有码中文字幕 亚洲成人大片一区二区三区 亚洲综合色视频在线观看 日韩精品一区二区三区激情视频 黄色av免费网站大全 神午夜久久亚洲精品电影闲 午夜av区一区二区三 精品少妇av一区二区三区 亚洲欧美日韩久久久久久 白白色发布视频在线播放 伊人大蕉香中文字幕青青 中文字幕日本不卡一区二区 欧美 成人一区二区三区 日本女优一区二区在线免费观看 网站免费正能量黄色污污 91久久蜜臀精品的社区功能 免费国产午夜视频在线 国内精品国产三级国产aa 国产黄色三级精品专区 日韩在线观看一二三区 日韩精品有码中文字幕 日本高清一区二区在线 日韩av二区三区电影 加勒比网视频在线观看 久久99日韩欧美影院你懂的 永久免费av网址在线观看 日韩毛片免费日韩免费毛片 极品中文字幕不卡综合一区二区 六月婷婷一区二区三区 精品人妻一区二区三区电影 99亚洲精品天天综合网 亚洲五月天中文字幕第一页 色狠狠一区二区三区香蕉 水蜜桃网站视频在线观看 欧美亚洲一区二区三区高清免费 免费高清国语自产拍视频在线不 九九九热精品免费视频观看 日本精品在线不卡视频 99精品国产成人综合麻豆 黄色av网站免费提供 国产精品黄色一区二区 日产欧美日韩综合精品一区二区 欧美在线一区二区视频观看 久久精品成人免费观看97 99精品欧美日韩在线播放 九九热视频 这里只有精品 国内国产精品三级av 久久久久亚洲精品男人的天堂av 亚洲欧美日韩久久久久久 粉嫩呦福利视频导航大全 国产免费一级a男人的天堂 欧美人与牲禽动交精品一区 亚洲av天堂一区二区三区 98欧美日韩精品亚洲欧美 娇妻互换享受高潮91九色 青青操免费公开在线视频 在线视频日本一区二区 深夜日本视频在线观看 精品国产99国产精品亚洲 自偷拍在线精品自偷拍视频 欧美高清在线一区二区三区 亚洲一个一区二区三区 国产亚洲欧美区一区二区三区 少妇精品亚洲一区二区成人 亚洲欧美国产一本综合首页 亚洲av高清一区二区三区偷拍 欧美亚洲一区二区三区高清免费 欧美高清在线一区二区三区 大香蕉六月丁香婷婷开心综合 黄视频网站在线免费观看91 日韩人妻少妇中文字幕在线 色婷婷精品国产综合成人 精品国产一区二区三区久久小说 久久久亚洲av成人网人人 蜜臀av在一区二区三区 日本一区高清视频在线观看的 国语精品91自产拍在线观看一区| 伊人久久大香色综合| 五月情综合网站久久| 玩弄丰满少妇高潮大叫| 日韩精品在线观看传媒| 黄色激情视频一级人妻| 日韩性生活片免费看| 中国黄色网站彩操逼大片儿视频。 | 亚洲国产中文字幕乱| 久久久青草视频社区| 久久久久久亚洲国产精品一区二区 | 熟女淫一区二区三区| 这里都是精品中文字幕| 国产精品乱码久久久久| 天天操天天操制服诱惑| h在线观看成人免费| 国模吧高清视频一区| 国内精品伊人久久久久| 高清国产区一区二区| 欧美日韩亚洲另类图片| 久久综合 中文字幕| 中年夫妇高清露脸自拍| 一区二区三区四区三级| 日韩欧美熟女资源一区| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 男人的天堂在线网站| 亚洲中文字幕五月婷婷| 在线日韩欧美一区二区| 亚洲色图自拍偷拍欧美| 人妻体内射精一二三区| 日韩爱爱一级免费视频| h在线观看成人免费| 日韩中文字幕精品久久| 另类欧美日韩国产专区| 日日夜夜精选免费观看| 亚洲综合丝袜另类制服| 91人妻人人妻人人爽| 日韩欧美一区二区不卡| 免费观看高清黄色往站| 国产一区二区免费观看| 欧美孕妇孕交猛烈进入| 99热热这里只精品| 成人免费高清视频在线| 短篇激情小说大尺度| 亚洲午夜精品福利影院| 中文字幕丝袜精品久久| 中国蜜桃一区二区三区| 日电影一区二区三区| 亚洲欧美日韩第一区| 国产欧美日韩高清专区手机版| 偷窥学校女厕撒尿BBBBB| 亚洲色图中文字幕人妻| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 欧美精品亚洲精品在线| 精品国产一区二区三区AV色诱| 日韩欧美高清第一区| 男人干女人能看到小穴的视频| 国内一区二区三区精品| 中文字幕 亚洲 欧洲| 亚洲天天久久精品中文字幕av| 久久久久久久久久久久久12p| 精品99久久久久久| 国产亚洲成av人片在线观看| 东京热免费视频精品| 午夜直播在线福利视频| 国产一区二区不卡区| 成人在线播放视频网址| 青青视频app下载| 久草精品在线播放视频| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 日本邻居少妇人妻p| 韩国电影伦理韩国电影| 电工三级考试多少钱| 成年免费大片黄在线观看↗火| 99少妇丰满人妻久久| 国产日韩欧美啊啊啊| 美女裸体啪啪无遮挡免费观看| 熟女视频一区二区中文| 国产精品久久老熟女| 久久精品国产久精久精| 少妇被艹亚洲一区二区| 亚洲国产婷婷综合在线未满精品| 婷婷人妻免费视频网站| 日本japanese丰满毛多| 美女性爽视频国产免费APP| 国产激情干炮五月天| 九九热最新地址在线| 大色网小色网大香蕉| 久久久久av性天堂| 成人免费无码精品国产电影在线 | 日本黄色xxx视频| 伊人久久大香色综合| 插入骚货视频在线观看| 探花约了个丰满少妇| 短篇激情小说大尺度| 成人在线播放视频网站| 伊人22成人开心网| 中文字幕一区二区三区在线免费| 玩弄丰满少妇高潮大叫| 亚洲精品亚洲成人网 | 巨乳少妇av中文字幕| 日日夜夜亚洲精品视频| 十八禁动漫网站免费| 求在线免费观看av| 欧美性生活视频69| 成人国产免费久久视频| 男女做爰刺激短视频| 日韩中文字幕天堂在线| 这里都是精品中文字幕| 亚洲狠狠婷婷综合久久| 午夜羞涩视频在线观看 | 116美女写真禁18| 国模吧高清视频一区| 日本剧情短片在线播放 | 青青操在线视频观看| 国语版的韩国电视剧| 天堂执法者亚洲帅哥| 蜜桃视频三级精品网站| 免费又黄又爽一区二区色| 黄色的美女视频网站| 韩国电影伦理韩国电影| 久操视频这里有精品| 加勒比成人精品视频| 雷电影图片高清壁纸| av网站在线天天有| 国产精品视频在线观看| 成人在线不卡av电影| av真人青青小草一区二区欧美 | 亚洲一区网站在线无码免费观看| 国产精品免费拍视频| 精品久久婷婷免费视频 | 天天摸日日干夜夜看| 丝袜高跟内射丝袜高跟| 91青娱乐在线视频观看| 日韩中文字幕第一页| 人妻少妇内射h在线| 77777日本欧美在线观看| 日本黄色xxx视频| 国产av熟女网站导航| 日本一区二区三区免费小视频| 又大又长又粗又黄国产| 精品国产乱码久久久久久婷婷| 求在线免费观看av| 亚洲综合丝袜另类制服| 亚洲人妻av资源网| 18禁韩漫在线免费看| 欧美精品一级黄色带| 在线观看日韩高清av| 少妇裸体做爰高潮片| 污污污免费在线播放| 台湾佬中文一区二区| 中文字幕av热热热| 亚洲色图在线观看视频一区二区 | 亚洲成人午夜精品电影| a v在线少妇人妻| 久久精品人妻少妇一品二品三品| 日本中文字幕人妻日韩| 操美女大嫩逼九九九九九九九九 | 日本巨黄泡妞视频免费| 精品中文日韩色影院| 欧美日韩a视频在线| 日韩亚洲国产欧美另类| 成人免费高清视频在线| 青春草av在线免费观看| av激情在线免费网| 中文一区不卡字幕在线| 秋霞中文字幕精品久久| 台湾佬中文一区二区| 成人一区二区不卡国产| 欧美熟妇brazzers厨房| 天美传媒麻豆蜜桃飘香| 欧美黄色网蜜桃视频| 国产欧美日韩综合网站| 亚洲中文字幕组av| 伊人春色色偷偷久久久| 免费日韩在线视频观看| 黄色免费电影二区三区| 九九热这里只有精品视频网站| 色av中文字幕在线| 欧美成人日韩在线观看| 久久伊人激情综合网| 国产精品丝袜一二三| 亚洲精品乱码中文字幕| 91年男88年女婚姻| 欧美性生活视频69| 亚洲午夜精品福利影院| 日韩熟女人妻一区二区| 推荐丝袜高跟在线观看| 116美女写真禁18| 亚洲中文字幕在线四区| 五月情综合网站久久| 91在线观看视频网| 免费在线播放不卡av| 熟女淫一区二区三区| 成人不卡av在线观看| 欧美视频播放一区二区| 国产精品无卡免费视频| 青青青青青青在线播放| 玩弄丰满少妇高潮大叫| 国产欧美日韩高清专区手机版| 电工三级考试多少钱| 污污一区二区在线观看| 大屁股白浆国产精品一区二区| 成人福利精品在线观看| 18禁美女露胸网站| 日本免费视频中文字幕| 亚洲无遮挡操逼视频| 久久精品国产91久久性色tv| 日本不卡一区二区免费在线观看| 欧美精品啪啪视频观看| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 在线亚洲国产丝袜日韩| 日本黄网站在线播放| 日本六十路熟女工口| 男女一起努力奋斗视频| 91成人免费电影在线| 女性阴道分泌物是黄色的| 少妇啊v一区二区三区| 幼女网站在线免费观看| 日韩欧美高清第一区| 日本人妻a人妻在线| 成人国产免费久久视频| 婷婷5月天四房播播| 久久精品国产91久久性色tv| 日韩欧美熟女资源一区| 成人福利精品在线观看| 开心快乐激情五月天| 制服丝袜AV无码专区完整版| 18禁韩漫在线免费看| 国产激情福利在线视频 | 亚洲天天久久精品中文字幕av| 欧美区一区二区在线| 日韩成人av一二区| 欧美与日韩性生活片| 国产一级黄色片自拍| 丰满肥臀大屁股熟妇激情热舞| 男的舔女的下面视频在线播放| 精品少妇人妻av免费一区二区| 国产精品丝袜一二三| 亚洲婷婷丁香综合网| 精品99久久久久久| 黄色免费电影二区三区| 91在线精品老司机免费播放| 18禁韩漫在线免费看| 亚洲午夜精品aaa| 男人的天堂啊啊啊啊| 花花草草寻亲记全集在线观看| 欧美日韩国产一级高清| 亚洲视频在线观看久久| 丰满人妻一区二区53| 日韩久久天天射欧美| 久久久成人综合亚洲欧洲精品| 欧美精品蜜桃在线观看| 国产AV人人夜夜澡人人爽小说| 97起碰人妻免费视频| 日本中文字幕人妻子| 亚洲自拍偷拍第十页| 十八禁视频在线播放亚洲| 日本一区在线观看视频| 人妻熟妇av在线一区二区三区| 国产网红主播一区二区| 激情综合网激情五月天| 国产亚洲av久久久| 美女张开腿男人桶到爽视频国产| 哪里可以看欧美黄片| 五月婷婷黄色小视频| 国产精品久久久久久无码AV| 国产精品自拍35页| 狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠| 中文字幕精品无码在线观看免费| 国产精品丝袜熟女系列| 免费在线观看中文字幕一区二区| 激情综合网激情五月天| 午夜动漫福利视频在线| 免费高清日本一区二区三区视频| 成人操逼在线观看视频| 成人黄视频免费观看| 日本成人在线你懂的| 亚洲日本岛国动作片在线观看| 亚洲AV成人一区二区三区不卡| 美女操逼视频到高潮| 精品99久久久久久| 插入骚货视频在线观看| 国产精品视频在线观看| 日本家庭午夜激情在线| 高清国产区一区二区| 国产av不卡一二区| 亚洲AV无码成人精品区一本二| 亚洲av综合一区二区三在线播 | 人人妻人人澡人人爽人人片av| 日本熟妇乱人视频在线| 日本女人的高潮视频| 色婷婷在线视频免费| 91麻豆手机福利导航在线视频| 在线免费观看网站你懂的| 熟女视频一区二区中文| 日本一区高清免费在线| 天天做天天爱天天大爽| 国产又大又长又粗又爽视频免费观看| 日韩精品福利电影网| 全是大胸的日本电影| 欧美精品亚洲精品在线| av一区二区免费看| 吃奶一区二区三区免费| 欧美 日韩 在线不卡| 国产高清毛片av在线| 九九热最新地址在线| 激情国产丝袜激情丝袜| 亚洲日本中文字幕人妻| 老司机精品视频一区二区三区| 精品人妻专区在线视频| 久久精品人妻少妇一品二品三品| 国产成人久久久久精品| 操人妻在线免费观看| 亚洲精品一区二区久久久久久| 欧美α片无限看在线观看免费| 成人一区二区不卡国产| 日韩中文字幕不卡免费| 亚洲精品乱码中文字幕| 日本夫妻性生活视频| 操人妻在线免费观看| 女人扒开自已的裤子让男人桶| 又大又色又爽的视频| 日本大乳高潮视频在线观看调教| 幼女网站在线免费观看| 亚洲精品亚洲成人网| 激情五月天综合激情网| 日本欧美国产中文字幕| 人妻中文字幕第23页| 久久亚洲AV无码国产精品麻豆| 久久久少妇一区二区三区电影| 色婷婷在线视频免费 | 精品人伦一区二区三区蜜桃在线| av蜜桃视频在线观看| 中文无码伦av中文字幕在线| 黑人操日本丝袜美女| 国产高清伦理在线视频| 亚洲精品天堂在线地址| 免费观看日韩在线视频| 欧美日韩国产一级高清| 九九热最新网址给我| 天堂网精品在线视频| 日本一道本免费在线| 欧美日韩亚洲中文另类| 免费观看日韩在线视频| 国产精品丝袜熟女系列| 成年美女很黄的网站| 青青青青青青在线播放| av电影在线天堂首页| 欧美日韩在线播放三区| 色婷婷久久综合久综合| 日本性生活免费视频| 丁香六月欧美成人黑| 91人妻人人妻人人爽| 国产网红主播一区二区| 一二三四视频免费在线| 欧美日韩国产一级高清| 麻豆人妻少妇av无码中文字幕| 免费在线播放不卡av| av电影在线观看网址| 女人午夜色又刺激黄的视频免费| 国产aaa精品自拍| 日本夫妻性生活视频| 伊人小美女操逼视频| 国产人成中文字幕| 日韩精品在线观看传媒| 亚洲天堂成人在线一区| 在线看很黄很污的视频| 日本japanese丰满多毛| 中文字幕一区二区三区在线免费| 在线观看日韩高清av| 亚洲av无码一区二区三区四区| 亚洲精品亚洲成人网| 久草精品在线播放视频| 老鸭窝天堂在线视频| 男人的午夜天堂在线| 伊人网在线视频少妇观看亚洲| av一区二区免费看| 欧美老熟妇黄色三级在线观看资源 | 人妻中文字幕在线观看| 一区二区三区偷拍女厕| 日本夫妻性生活视频| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| jizz女人高潮喷水一区二区| 99热九九这里只有精品| 另类欧美日韩国产专区| 国产综合一二三四区| 激情综合网激情五月天| 国产日韩欧美成人免费| 日韩专区熟妇人妻自拍偷拍视频| 久久久久久亚洲国产精品一区二区| 亚洲一区二区三区久久久久久久| av在线播放亚洲最大| 国产又色又爽又刺激在线观看| 人妻制服丝袜步兵在线| 日本视频三区在线播放| 啪一啪天天操夜夜爽| 无码国精品一区二区免费下载 | 久操视频这里有精品| 黄色激情四射在线观看| 伊人久久大香色综合| 久久天天操天天摸精品| 9久精品久久综合久久超碰1| 日本一道本免费在线| 亚洲欧美不卡高清在线| 韩国电影伦理韩国电影 | 色蜜桃视频免费观看| 中文字幕在线看一下| 免费高清日本一区二区三区视频| 风间由美在线理论片| 亚洲中文字幕在线四区| 9久精品久久综合久久超碰1| 国内精品伊人久久久久| 久久九九99热这里只有精品| 丰满老熟妇好大bbbbb四p| 欧美日韩亚洲另类图片| 日本性生活免费视频| 国产一区二区免费观看| av在线中文字幕观看| 欧美激情五月综合啪啪| 黄色免费电影二区三区| 巨乳人妻中文字幕在线| 欧美日韩国产中文视频| 欧美日韩欧美日韩在线| 久久精品国产久精久精| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 日本一区在线观看视频| 久久亚洲欧美国产精品观看97| 91福利网址在线观看| av在线播放亚洲最大| 日韩免费在线观看一区| 欧美色网站一区二区三区| 美熟女一区二区三区| 九九热这里只有精品视频网站| 久久久久av性天堂| 国产精品久久久入口| 小福利合集午夜青青草| 国产饥渴熟女91专区| 成人天堂av一二区| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕性生活| 日本中文字幕人妻子| 欧洲日本国产一区二区| 欧洲日本国产一区二区| 亚洲精品一区二区久久久久久| 亚洲欧美制服另类在线| 欧美日韩国内在线视频| 天天做天天爱天天大爽| 国产911操逼视频| 日本中文字幕人妻子| 人妻内射视频免费看| 久久久亚洲熟妇熟网站| 又大又色又爽的视频| 大香蕉久久精品中文网| 青青草视频网址入口| 日韩福利视频导航网站| 91成人在线小视频| av电影在线天堂首页| 日本a级视频久久久久| 亚洲免费a在线观看| 午夜日韩在线免费视频| 日本欧美一区二区东京| 玩弄丰满少妇高潮大叫| 成人十八禁免费观看| 日韩特黄免费在线观看| 亚洲av迷一区二区| 日本av毛片免费中文| 久久嫩草人妻少妇av| 午夜直播在线福利视频| 日韩av在线观看入口| 韩国性电影爱的色放| y成人亚洲香蕉av| 国产日韩欧美啊啊啊| 日韩性感美女视频二区| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 韩国18禁在线电影| 日本第一毛片东京热| 女人扒开自已的裤子让男人桶| 精品视频一区二区三区在线播放| 午夜精品1区2区3区| 精品偷拍一区二区三区| 91精品人妻一区二区三区香蕉| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 久久综合 中文字幕| 国产主播网站在线观看| 日韩精品福利电影网| 少妇被无套内射久久久| 亚洲av无码一区二区三区四区| 国产主播网站在线观看| 情色小说在线免费看| 真人大鸡巴操大屁股国语国语| 久久亚洲欧美国产精品观看97| 少妇裸体做爰高潮片| 久久亚洲欧美国产精品观看97| 亚洲欧美不卡高清在线| 国产一区二区免费观看| 国产性一交一乱一伦一色一情| 九九热最新网址给我| 女人午夜色又刺激黄的视频免费| 成年美女很黄的网站| 久久久少妇一区二区三区电影| 99热热这里只精品| 中文字幕 亚洲色图| 久久久国产成人a视频| 国产AV人人夜夜澡人人爽小说| 蜜桃视频三级精品网站| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 人妻制服丝袜步兵在线| 国产成人久久久久精品| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕性生活 | 伦理激情麻豆国产一区| 又大又长又粗又黄国产| 中国黄色网站彩操逼大片儿视频。| 日本伦理视频在线观看| 伊人成人黄色综合网| 国产一区二区不卡区| 久久久成人综合亚洲欧洲精品| 青青视频app下载| 国产情侣在线不卡视频| 丝袜美腿在线观看四区| 日韩av 中文字幕| AAAAAA级裸体美女毛片| 欧美三级黄片免费看| 国产AV人人夜夜澡人人爽小说| 91精品一区在线观看| 国产欧美日韩高清专区手机版| 久久精品人妻少妇一品二品三品| 狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠狠| 日韩国产欧美一区二区三区在线| 免费高清日本一区二区三区视频 | 亚洲AV成人一区二区三区不卡| 国产欧美日韩综合网站 | 国产激情干炮五月天| 看全黄大片视频不卡| 久久久成人综合亚洲欧洲精品| 操我视频在线网站啊啊| 免费又黄又爽一区二区色| 91精品国产91热久久福利| 国产精品久久久久久久久三级| 自拍一区国产在线播放| 免费的十八禁漫画网站| 欧美亚洲另类二区在线| 日本的操逼网站快播| 欧美 日韩 在线不卡| 古代女子对男子的尊称| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产av 天堂亚洲| 人妻一本久道久久综合久久鬼色| 老司机免费高清视频| 91福利网址在线观看| 日韩欧美熟女资源一区| 欧美视频播放一区二区| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 国产一区二区亚洲精品在线观看| 少妇被艹亚洲一区二区| 在线观看免费欧美精品| 一日本道在线观看.| 99re6热精品视频在线观看| 免费啪啪视频午夜影视| 九九热这里只有精品视频网站| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 午夜精品一区二区三区在线观看 | 人人妻人人澡人人爽人人片av| 婷婷综合网在线观看| 日本欧美一区二区东京| 经典国产对白乱子伦精品视频| 香蕉多少片叶子结果| 国产性一交一乱一伦一色一情| 日本中文字幕人妻子| 亚洲成人午夜精品电影| 成人在线播放视频网址 | 少妇啊v一区二区三区| 情色小说在线免费看| 经典国产对白乱子伦精品视频| 亚洲色图色欧美偷拍| av电影在线观看网址| 日韩av在线观看入口| 国产女人乱人伦精品一区二区| 香蕉久久这里只有精品| 亚洲人妻激情视频在线| 大香蕉久久精品中文网| 熟女视频一区二区中文| 亚洲中文字幕无码久久久久久久久| 色呦呦国产午夜精品| 欧美一区二区三区人| 中国蜜桃一区二区三区| 99热九九这里只有精品| 姐姐的诱惑中文字幕| 男人干女人能看到小穴的视频| av在线中文字幕观看| 女人为什么喜欢操逼| 男生小鸡鸡插女生逼| 九九热最新网址给我| 精品无码国产自产在线观看水浒传| 欧美二区三区在线观看| 91青青草精品视频| 91年男88年女婚姻| 国产综合一二三四区| 青青青国产手线观看视| 欧洲日本国产一区二区| 天天抠逼夜夜操美女| 亚洲精品亚洲成人网| 青青青国产手线观看视| 国产精品无卡免费视频| 美女张开腿男人桶到爽视频国产| 老鸭窝天堂在线视频| 国产亚洲av久久久| 亚洲欧洲国产精品久久久蜜臀| 亚洲午夜精品aaa| 在线日韩欧美一区二区| 日韩一级特黄高清免费| 欧美亚洲另类二区在线| 青青视频在线免费看| 成人在线不卡av电影| 男生小鸡鸡插女生逼| 成人十八禁免费观看| 成年免费大片黄在线观看↗火| 国内精品久久久久久一区二区| 亚洲精品中文字幕乱码| 日本成人性生活免费看| 男女做爰刺激短视频| 成人免费高清视频在线| 国产女人乱人伦精品一区二区| 五月情综合网站久久| 亚洲欧洲国产精品久久久蜜臀| 久久精品国产91久久性色tv| 久久亚洲欧美国产精品观看97 | 中文字幕第8页在线| 午夜精品人妻久久久| 日日夜夜精选免费观看| 国产主播网站在线观看| 日本不卡一区二区免费在线观看| 久久精品国产91久久性色tv| 成人操逼在线观看视频| 在线观看日韩高清av| 亚洲av迷一区二区| 天美传媒麻豆蜜桃飘香| 台湾佬中文一区二区| 大香蕉这里只有精品| 国产精品乱码久久久久| 久久久青草视频社区| 哈哈操电影在线观看| 日本成人性生活免费看| 国产精品久久久久久无码AV| 狠狠插狠狠操狠狠干| 久久亚洲堂色噜噜AV入口网站| 免费看啪啪国产网站| 美女隐私视频网站入口| 婷婷 丁香 自拍偷拍| 美熟女一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| 张开你的双腿让我进入| 亚洲中文字幕组av| 女生露出大鸡巴性感跳舞的视频| 91成人免费电影在线| 久久久久av性天堂| 五月天网站在线播放| 蜜桃臀福利视频导航| 蜜桃视频在线观看二区| 一区二区黄色在线观看| 精品久久久久免费成人码动漫 | 日本六十路熟女工口| 青青草原免费在线看| 青青草视频网址入口| 成年美女视频在线观看| 东北风流少妇高潮大叫| 蜜桃视频在线观看二区| 日本大乳高潮视频在线观看调教| 国产av超碰碰超爽| 黄色在线看免费观看| 黄色激情四射在线观看| 欧美日韩三级久久久久| 偷窥学校女厕撒尿BBBBB| 丰满老熟妇好大BBBBB仙踪林| av蜜桃视频在线观看| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 插p视频免费在线观看| 亚洲中文字幕无码久久久久久久久| 国产精品久久久久久岛国欧美| 欧美黑人视频与另类| 日韩精品福利电影网| 日韩福利视频导航网站| 十八禁动漫网站免费| 最新老熟女av导航| 好看的国产天堂av| 久久亚洲AV无码国产精品麻豆| 伊人久久大香色综合| 18禁成人动漫下载| a天堂中文在线88| 欧美精品啪啪视频观看| 欧美精品国产精品综合| 伊人网在线视频少妇观看亚洲| 韩国18禁在线电影| 中国老男人操逼视频| 中文乱码文字幕av| 日韩欧美熟女资源一区| 中文乱码文字幕av| 男人的天堂国产av一区二区三区| 青青视频在线免费看| 国产精品亚洲国产在线手机版| 日本特殊的精油按摩在线播放| 国产av熟女网站导航 | 插逼视频双插洞国产操逼插洞 | h在线观看成人免费| 女人扒开自已的裤子让男人桶 | 男人天堂视频在线官网| jizz女人高潮喷水一区二区| 久操视频这里有精品| 欧美日韩欧美日韩在线| 国产精品丝袜熟女系列| 美日韩美女操逼视频| 久久久成人综合亚洲欧洲精品| 亚洲av无乱一区二区三区性色 | 日韩美女操逼视频网址| 日韩性感美女视频二区| 国产成人久久久久精品| a v在线少妇人妻| 欧美老熟妇黄色三级在线观看资源| 国产区高清在线一区二区三区| 欧美精品久久久久久久69堂 | 亚洲人色婷婷成人网| 狠狠插狠狠操狠狠干| 长春欧亚卖场是哪个区| 韩国18禁在线电影| 日本欧美一区二区东京 | 国产主播网站在线观看| 无码精品人妻一区二区三区白浆| 老鸭窝天堂在线视频| 国产精品自拍35页| 国产亚洲成av人片在线观看| 九九热精品官网视频| 亚洲2017男人天堂| 亚洲免费a在线观看| 午夜精品1区2区3区| 亚洲天堂成人在线一区| 黄色激情四射在线观看| 啪一啪天天操夜夜爽| 国产性一交一乱一伦一色一情| 亚洲精品亚洲成人网| 精品人妻专区在线视频| 亚洲免费a在线观看| 在线免费观看网站你懂的| 中文字幕第8页在线| 天天谢天天操天天日| 久久精品 一区二区| 台湾妹子中文娱乐网天天久久综合| 美女性爽视频国产免费APP| 亚洲人妻av资源网| 久久亚洲AV无码国产精品麻豆| 国产高清毛片av在线| 1234日韩不卡视频| 日本东京热在线视频| 国产视频青青青在线播放| 午夜精品美女久久久久| 巨乳少妇av中文字幕| 欧美在线天堂一区二区| 一日本道在线观看.| 国产又色又爽又刺激在线观看| 东京热免费视频精品| 日本女人的高潮视频| 天天干天天操美女麻豆| 色呦呦国产午夜精品| 美女裸体啪啪无遮挡免费观看| 色婷婷久久综合网站| 亚洲av无码一区二区三区四区| 欧美日韩a视频在线| 五月天在线播放婷婷| 俄罗斯胖女人黄色片| 中文字幕丝袜精品久久| 成人黄视频免费观看| 男人的天堂在线网站| 91麻豆手机福利导航在线视频| 黑人操日本丝袜美女| 中国三级黄色靠逼视频啊啊啊啊啊| 欧美成人激情xxx| 制服丝袜 一区二区| 日本放荡的熟妇在线| 免费播放婬乱男女婬视频国产| 在线观看成人字幕吗| 亚洲2017男人天堂| 日韩精品中文字幕不卡| 男人的天堂国产av一区二区三区| 亚洲爱情侣自拍品质| 丁香六月欧美成人黑| 午夜日韩在线免费视频| 青青操在线视频观看| 国产人成中文字幕| 东京热免费视频精品| 中国黄色网站彩操逼大片儿视频。 | 精品国产丝袜在线拍| 亚洲欧洲日本在线色| 99热九九这里只有精品| 免费观看日韩在线视频| 最新老熟女av导航| 久久久青草视频社区| 国内精品人妻无码久久久影院| 婷婷5月天四房播播| 啪啪啪啪啪啪啪伦理片| 两个人的小森林在线播放高清 | 精品人妻一区二区人| 日韩欧美熟女资源一区| 美女18禁国产精品| 伊人春色色偷偷久久久| 久久精品国产久精久精| 91精品一区二区在线| 亚洲无遮挡操逼视频| 九九热精品官网视频| 在线观看日韩高清av| 女人扒开自已的裤子让男人桶| 日韩av成人精品久久| 一日本道在线观看.| 午夜精品美女久久久久| 色99视频在线观看| 男女午夜大片在线观看| 一区二区三区四区欧洲| 国产高清伦理在线视频| 国产成人久久久久精品| 欧美性生活视频69| 91精品一区二区在线| 亚洲激情人妻校园春色| 东北风流少妇高潮大叫| 日韩av电影网站网址| 欧美黑人视频与另类| 亚洲午夜一二三熟女| 丁香妞久久激情五月天| 成人黄视频免费观看| 日韩三级黄色免费网站| 午夜精品人妻久久久| 中文字幕日本免费在线| 中文字幕日本免费在线|